Форма м8 образец заполнения: Лимитно-заборная карта М-8. Образец заполнения 2021 года

Содержание

Лимитно-заборная карта М-8. Образец заполнения 2021 года

Основной документ, который регулирует отпуск материальных ценностей внутри компании — лимитно-заборная карта по форме М-8. Используется она, как правило, тогда, когда на предприятии происходит систематическая передача товаров и материалов из одного подразделения в другое (чаще всего со склада).

ФАЙЛЫ
Скачать пустой бланк лимитно-заборной карты по форме М-8 .docСкачать образец заполнения лимитно-заборной карты по форме М-8 .doc

Кто устанавливает лимит

Установка лимита – прерогатива директора фирмы или уполномоченных специальным приказом либо распоряжением на это действие лиц (например, начальника отдела, участка, цеха и т.п.). Расчет лимита производится путем анализа расходования материалов на выпуск продукции, производственных мощностей и фактических объемов.

Непосредственным заполнением документа занимаются бухгалтера предприятий и кладовщики.

Иногда возникает потребность в сверхлимитном потреблении материалов. Это возможно только по особому разрешению руководителя предприятия в строго установленном порядке, при соблюдении отдельных требований.

Правила оформления лимитно-заборной карты

Стандартного, единого образца по оформлению лимитно-заборной карты не существует, так что предприятия и организации могут разрабатывать данный документ на свое усмотрение, пользоваться шаблонами или использовать ранее общеприменимую форму М-8. Независимо от того, какой способ выберет компания, есть определенные нормы, которых стоит придерживаться при заполнении документа.

В карту обязательно следует внести:

  • данные об организации, отпускающей товарно-материальные ценности,
  • сведения о получателе (т.е. структурном подразделении),
  • дату заполнения документа,
  • цифровое значение лимита,
  • подробную информацию о самой продукции.

Документ должен иметь несколько подписей: установщика лимита, представителя подразделения, получившего товарно-материальные ценности, а также кладовщика. Печать на документе ставить необязательно, поскольку он относится к внутренней документации предприятия.

Лимитно-заборную карту нужно выписывать отдельно на каждый вид тех или иных товаров и материалов. Однако при условии взаимозаменяемости, можно вносить несколько разновидностей, при этом делая в карточке пометку «Замена по требованию №…».

Документ оформляется в двух копиях, одна из которых предается на руки получателю материалов или товаров (на участок, в цех, в отдел и т.д.), вторая остается у отправителя (на складе).

После того, как указанный лимит будет использован, кладовщик должен сдать документ в бухгалтерию организации. При этом по правилам, сдавать карту нужно регулярно, не реже одного раза в месяц. Рекомендуется передавать карту одновременно с отчетом о движении материалов (в соответствии с принятым в организации графиком).

Хранить лимитно-заборную карту необходимо, как и другие внутренние документы предприятия:

не менее пяти лет.

Инструкция по заполнению формы М-8

Часть первая

  • Сначала, вверху документа необходимо проставить его номер в соответствии с внутренним документооборотом.
  • Затем, ниже вписывается наименование предприятия, а также код ОКПО (Общероссийский классификатор предприятий и организаций – сведения можно взять из учредительных бумаг).
  • Далее, в первую таблицу вписывается дата составления лимитно-заборной карты, код вида операции (при условии, что такая система используется), отправитель и получатель (названия структурных подразделений).
  • Следующим шагом вносим информацию о бухгалтерском субсчете, коде аналитического учета материалов, которые списываются и единице отпуска товара.

Часть вторая

Вторая часть документа включает в себя таблицу с подробностями об отпускаемых материалах.

  • Сначала вписываются характеристики: наименование, сорт, размер, марка продукции, затем в ячейке «лимит» указывается разрешенное к отпуску точное
    количество товара
    (эту графу может заполнить работник, который высчитывает лимиты по применению материальных ценностей, или тот, кто лично занимается выпиской лимитно-заборных карт), потом вносится порядковый номер учетной карточки по картотеке склада.
  • Далее заполняем номенклатурный номер (при его наличии), сколько всего отпущено (с учетом возвратов), затем идет информация о единицах измерения: наименование единицы измерения данного товара или материала (килограммы, метры, штуки и т.п.), а также ее код в соответствии с ОКЕИ (Общероссийский классификатор единиц измерения).
  • Потом вписывается стоимость товара (за штуку) и общая сумма (без НДС).
  • После этого в таблице идут строки по конкретному отпуску товарно-материальных ценностей, в которые надо вписывать дату, количество, остатки лимита (при условии, что он выбран не весь) и подпись кладовщика.

Лимитно-заборная карта должна быть заверена сотрудниками, которые несут прямую ответственность за выдачу со склада фирмы материалов и товаров с указанием их должностей и подписями с расшифровкой.

Лимитно-заборная карта М-8 в 2021 году

Автор Ольга Петрова На чтение 3 мин Обновлено

Порядок заполнения лимитно-заборной карты форма М-8. Скачать бесплатно бланк и образец заполнения формы М-8 в формате word.

Лимитно-заборная карта форма М-8 оформляется для регулирования потребления материалов при установлении лимитов на их расход. Данные лимиты могут быть установлены самим руководителем или, например, экономистом после проведения необходимых расчетов. При этом отпуск материалов со склада производится в пределах установленных лимитов на основании бланка лимитно-заборной карты. При необходимости отпуска материалов сверх лимита происходит согласование с руководством, при его согласии оформляются заявки на сверхлимитное потребление. Скачать бланк формы М-8, а также образец заполнения лимитно-заборной карты можно в конце статьи.

Оформление лимитно-заборной карты выполняется с использованием унифицированной формы М-8. На каждый вид материалов заполняется отдельная карта, составляется она в двух экземплярах, первый предназначается для принимающей стороны (цех), второй остается у передающей стороны (на складе).

Если лимиты для материалов не устанавливаются, то отпуск производится на основании требования М-11 (при внутреннем перемещении) или накладной М-15 (при отпуске на сторону).

Поступление материалов на склад оформляется приходным ордером М-4, скачать образец которого можно здесь. После чего на каждый вид материалов заводится карточка по форме М-17.

Порядок заполнения формы М-8

Вверху ставится номер бланка, ниже название предприятия.

Далее указывается:

  • дата заполнения формы,
  • код операции при разработанной системе кодов,
  • вид деятельности — для чего необходимы затребованные материалы,
  • наименования подразделений отпускающей и принимающей сторон,
  • корреспондирующий счет – заполняет бухгалтер,
  • учетная единица, в которой производится выпуск,
  • сведения о материальных ценностей – наименование, номенклатурный номер, наименование единицы измерения и ее код ОКЕИ. Наименование материалов берется из карточки учета форма М-17.
  • графа «лимит» — максимально допустимая величина для отпуска со склада. В процессе выдачи материалов данная величина будет уменьшаться.

При необходимости получить данные материальные ценности со склада работником предъявляется лимитно-заборная карта с указанным лимитом. Работник склада, например, кладовщик отпускает необходимо количество материалов, в обоих бланках лимитно-заборной карты кладовщик ставит в строке «отпущено» дату отпуска и количество отпущенных материалов и остаток лимита.

В экземпляре получателя расписывается работник склада, в экземпляре отправителя расписывается работник, получивший материалы.

Каждое отдельное получение материалов прописывается отдельной строкой. Отпуск данного наименования производится в пределах прописанного в бланке лимита.

По окончанию действия лимита считается итоговый остаток в поле «всего отпущено с учетом возврата». Бухгалтер указывает цену единицы материалов и стоимость отпущенных материалов без НДС.

Лица, ответственные за выдачу и получение материальных ценностей по лимитно-заборной карте, подписывают заполненный бланк М-8, ставится дата закрытия документа.

Скачать бланк и образец

Скачать образец лимитно-заборной карты форма М-8 – ссылка.

Скачать бланк форма М-8 – ссылка.

Лимитно-заборная карта М-8 — образец заполнения. Новый бланк лимитно-заборной карты :: BusinessMan.ru

Правильный и точный учет ТМЦ на предприятиях происходит с помощью многих бухгалтерских документов, одним из которых является лимитно-заборная карточка.

Что такое лимитно-заборная карточка

Лимитно-заборная карточка — это первичный бухгалтерский документ накопительного характера, который выступает основанием для списания МЦ со склада предприятия в цеха, на участки этого же предприятия. Количество материалов выписывается на основании их плановой потребности.

Название и непосредственно сама форма документа была разработана еще в Советском Союзе и дошла до наших дней. «Лимит» означает вид ограничения, «заборная» — т.е. отпуск, получение ТМЦ, «карта» — свидетельствует о том, что это бланк строгой отчетности.

Лимитно-заборная карта оформляется при наличии лимитов на отпуск материалов, которые будут использоваться при изготовлении собственной продукции, т.е. это внутренний документ. Она контролирует работу складских сотрудников, особенно тех, кто честно выполняет свои обязанности — гарантирует им защиту от обвинений, подозрений в воровстве.

Для чего ее используют

Чтобы выполнять производственную деятельность, структурным подразделениям предприятия необходимо осуществлять систематическое потребление МЦ различного назначения. Количество МЦ устанавливается благодаря лимитам, которые определяются для каждого наименования.

Лимиты МЦ, в свою очередь, формируются из утвержденных норм потребления на 1 ед. готовой продукции, а также согласно объемам выпуска этой продукции по производственным программам участков, цехов. За утверждение лимитов отвечают руководители предприятий или прочие уполномоченные ими лица.

Движение МЦ документально отображается с помощью лимитно-заборных карточек, которые также являются оправдательным документальным основанием для выписки МЦ со склада в другие структурные подразделения предприятия. Кроме этого, лимитно-заборная карточка содействует текущему контролю над соблюдением установленных лимитов расхода ТМЦ. Материал отпускается только с того склада, который указан в лимитно-заборной карточке.

Благодаря лимитной карте происходит учет материалов, которые не были задействованы в производстве (возврат). Если необходимо отпустить материал сверх лимита или заменить номенклатуру, указанную в карточке, на другую, тогда это происходит с разрешения руководителя или уполномоченных лиц.

Что необходимо сделать перед заполнением лимитно-заборных карточек?

Плановый отдел, отдел материального снабжения должен выписать на месяц, в некоторых случаях на квартал, полугодие, год лимитно-заборные карточки с установленными лимитами в 2-х экземплярах. Эти карты должны иметь месячные отрывные талоны на фактический отпуск МЦ. Один из экземпляров карточки отдается потребителю МЦ (участок, цех), другой — передается на склад.

Лимиты необходимо обосновать и подписать руководителем. Если лимиты расходования необходимо незапланированно увеличить, тогда руководитель структурного подразделения должен оформить дополнительное требование. Когда руководитель разрешит увеличить лимит, тогда в лимитно-заборной карточке делают следующую отметку: «Замена, смотри требование №__».

Как она заполняется

В обоих экземплярах нужно указать наименование предприятия, код, который характеризует операцию по перемещению ТМЦ, номер, дату документа, вид деятельности, установленный лимит, номенклатурный номер ТМЦ, если таковой предусмотрен на предприятии, то же касается и кода ОКЕИ, наименование, шифр затрат, информацию о получателе и отправителе, цех, какое количество было отпущено и какой стал остаток. Указывается единица измерения продукции (килограмм, упаковка, штука, метр), в качестве которой могут выступать как материалы, так и определенные услуги. Наименование расписывается максимально подробно: марка, размер, сорт.

Отпуск МЦ происходит в том случае, когда представитель цеха, участка предъявляет на складе свой экземпляр карточки, после чего кладовщик отметит в своей лимитно-заборной карточке и в экземпляре заказчика дату, количество отпущенных МЦ, и уже после этого кладовщик выводит остаток и аналогично расходу записывает его в карточки.

По истечении месяца оба экземпляра карточек передаются в бухгалтерию для того, чтобы бухгалтер отобразил расход МЦ на должных счетах БУ и указал в карточках синтетические счета, субсчета, которые участвуют в корреспонденции, цены каждого ТМЦ без учета НДС и коды аналитического учета МЦ. Когда лимитно заборные карточки закрываются, бухгалтер подводит итог по количеству выданных ТМЦ и записывает их стоимостное значение. Если были возвраты неиспользованных ТМЦ, их стоимость указывается со знаком минус. Датой закрытия карточки считается момент подписания ее руководителями подразделений, которые отдают и получают ТМЦ. Все экземпляры должны быть подписаны и представителем подразделения и кладовщиком.

Лимитно-заборная карта, образец заполнения которой можно увидеть на фото, выписывается и заполняется на одно наименование МЦ, по одному номенклатурному номеру.

Формы лимитно-заборных карточек

  1. Лимитно-заборная карта М-8 — это первичный учетный документ унифицированной типовой межотраслевой формы, которая была утверждена 30.10.97г. постановлением N 71а Госкомстата России.
  2. Лимитно-заборная карта (форма 62) — первичный учетный документ, предназначенный для списания ТМЦ со складов предприятия в его цеха или участки. Эту форму уже не используют, т.к. она не составлена по унифицированной форме в альбомах первичных учетных документов. Следуя приказу Минфина РФ от 28.12.2001 г. № 119Н, первичной учетной документацией по расходу МЦ со складов предприятия в его подразделения является лимитно-заборная карта (типовая межотраслевая форма N М-8).
  3. Лимитно заборная карта, форма 117 — это специализированная форма, утвержденная Госагропромом СССР 20.03.87 N 281-4. Ранее использовалась в агропромышленном комплексе, но также потеряла силу действия, как и форма 62.

Обязательно ли надо использовать лимитно-заборные карточки?

Лимитно-заборная карта (форма М-8) может использоваться предприятиями как примерный образец, т.к. статьей 9 ФЗ от 06.12.11 г. № 402-ФЗ о «Бухгалтерском учете» с 01.01.13 г. требования по использованию унифицированных форм первичной учетной документации были аннулированы.

Карточки обязательно используются на предприятиях, где присутствуют лимиты на отпуск материалов, зачастую на массовом, пищевом производстве.

С появлением автоматизированного учета необходимость в лимитно-заборных карточках постепенно отпадает, это касается нестандартного, мелкосерийного производства. Если на предприятии отсутствуют требования внутреннего регламента по поводу формы учета расхода МЦ, тогда его можно вести только в электронном виде, без выписки бумажного носителя.

Заборная карта форма м 8. Что такое лимитно-заборная карточка. Лимитно-заборная карта: образец заполнения

Правильный и точный учет ТМЦ на предприятиях происходит с помощью многих бухгалтерских документов, одним из которых является лимитно-заборная карточка.

Что такое лимитно-заборная карточка

Лимитно-заборная карточка — это первичный бухгалтерский документ накопительного характера, который выступает основанием для списания МЦ со склада предприятия в цеха, на участки этого же предприятия. Количество материалов выписывается на основании их плановой потребности.

Название и непосредственно сама форма документа была разработана еще в Советском Союзе и дошла до наших дней. «Лимит» означает вид ограничения, «заборная» — т.е. отпуск, получение ТМЦ, «карта» — свидетельствует о том, что это бланк строгой отчетности.

Лимитно-заборная карта оформляется при наличии лимитов на отпуск материалов, которые будут использоваться при изготовлении собственной продукции, т.е. это внутренний документ. Она контролирует работу складских сотрудников, особенно тех, кто честно выполняет свои обязанности — гарантирует им защиту от обвинений, подозрений в воровстве.

Для чего ее используют

Чтобы выполнять производственную деятельность, структурным подразделениям предприятия необходимо осуществлять систематическое потребление МЦ различного назначения. Количество МЦ устанавливается благодаря лимитам, которые определяются для каждого наименования.

Лимиты МЦ, в свою очередь, формируются из утвержденных норм потребления на 1 ед. готовой продукции, а также согласно объемам выпуска этой продукции по производственным программам участков, цехов. За утверждение лимитов отвечают руководители предприятий или прочие уполномоченные ими лица.

Движение МЦ документально отображается с помощью лимитно-заборных карточек, которые также являются оправдательным документальным основанием для выписки МЦ со склада в другие структурные подразделения предприятия. Кроме этого, лимитно-заборная карточка содействует текущему контролю над соблюдением установленных лимитов расхода ТМЦ. Материал отпускается только с того склада, который указан в лимитно-заборной карточке.

Благодаря лимитной карте происходит учет материалов, которые не были задействованы в производстве (возврат). Если необходимо отпустить материал сверх лимита или заменить номенклатуру, указанную в карточке, на другую, тогда это происходит с разрешения руководителя или уполномоченных лиц.

Что необходимо сделать перед заполнением лимитно-заборных карточек?

Плановый отдел, отдел материального снабжения должен выписать на месяц, в некоторых случаях на квартал, полугодие, год лимитно-заборные карточки с установленными лимитами в 2-х экземплярах. Эти карты должны иметь месячные отрывные талоны на фактический отпуск МЦ. Один из экземпляров карточки отдается потребителю МЦ (участок, цех), другой — передается на склад.

Лимиты необходимо обосновать и подписать руководителем. Если лимиты расходования необходимо незапланированно увеличить, тогда руководитель структурного подразделения должен оформить дополнительное требование. Когда руководитель разрешит увеличить лимит, тогда в лимитно-заборной карточке делают следующую отметку: «Замена, смотри требование №__».

Как она заполняется

В обоих экземплярах нужно указать наименование предприятия, код, который характеризует операцию по перемещению ТМЦ, номер, дату документа, вид деятельности, установленный лимит, номенклатурный номер ТМЦ, если таковой предусмотрен на предприятии, то же касается и кода ОКЕИ, наименование, шифр затрат, информацию о получателе и отправителе, цех, какое количество было отпущено и какой стал остаток. Указывается единица измерения продукции (килограмм, упаковка, штука, метр), в качестве которой могут выступать как материалы, так и определенные услуги. Наименование расписывается максимально подробно: марка, размер, сорт.

Отпуск МЦ происходит в том случае, когда представитель цеха, участка предъявляет на складе свой экземпляр карточки, после чего кладовщик отметит в своей лимитно-заборной карточке и в экземпляре заказчика дату, количество отпущенных МЦ, и уже после этого кладовщик выводит остаток и аналогично расходу записывает его в карточки.

По истечении месяца оба экземпляра карточек передаются в бухгалтерию для того, чтобы бухгалтер отобразил расход МЦ на должных счетах БУ и указал в карточках синтетические счета, субсчета, которые участвуют в корреспонденции, цены каждого ТМЦ без учета НДС и коды аналитического учета МЦ. Когда лимитно заборные карточки закрываются, бухгалтер подводит итог по количеству выданных ТМЦ и записывает их стоимостное значение. Если были возвраты неиспользованных ТМЦ, их стоимость указывается со знаком минус. Датой закрытия карточки считается момент подписания ее руководителями подразделений, которые отдают и получают ТМЦ. Все экземпляры должны быть подписаны и представителем подразделения и кладовщиком.

Лимитно-заборная карта, образец заполнения которой можно увидеть на фото, выписывается и заполняется на одно наименование МЦ, по одному номенклатурному номеру.

Формы лимитно-заборных карточек

  1. Лимитно-заборная карта М-8 — это первичный учетный документ унифицированной типовой межотраслевой формы, которая была утверждена 30.10.97г. постановлением N 71а Госкомстата России.
  2. Лимитно-заборная карта (форма 62) — первичный учетный документ, предназначенный для списания ТМЦ со складов предприятия в его цеха или участки. Эту форму уже не используют, т.к. она не составлена по унифицированной форме в альбомах первичных учетных документов. Следуя приказу Минфина РФ от 28.12.2001 г. № 119Н, первичной учетной документацией по расходу МЦ со складов предприятия в его подразделения является лимитно-заборная карта (типовая межотраслевая форма N М-8).
  3. Лимитно заборная карта, форма 117 — это специализированная форма, утвержденная Госагропромом СССР 20.03.87 N 281-4. Ранее использовалась в агропромышленном комплексе, но также потеряла силу действия, как и форма 62.

Обязательно ли надо использовать лимитно-заборные карточки?

Лимитно-заборная карта (форма М-8) может использоваться предприятиями как примерный образец, т.к. статьей 9 ФЗ от 06.12.11 г. № 402-ФЗ о «Бухгалтерском учете» с 01.01.13 г. требования по использованию унифицированных форм первичной учетной документации были аннулированы.

Карточки обязательно используются на предприятиях, где присутствуют лимиты на отпуск материалов, зачастую на массовом, пищевом производстве.

С появлением автоматизированного учета необходимость в лимитно-заборных карточках постепенно отпадает, это касается нестандартного, мелкосерийного производства. Если на предприятии отсутствуют требования внутреннего регламента по поводу формы учета расхода МЦ, тогда его можно вести только в электронном виде, без выписки бумажного носителя.

Типовая межотраслевая форма N М-8 утверждена Постановлением Госкомстата России от 30.10.97 N 71а

Лимитно-заборная карта (форма № М-08) — применяется при наличии лимитов отпуска материалов для оформления отпуска материалов, систематически потребляемых при изготовлении продукции, а также для текущего контроля за соблюдением установленных лимитов отпуска материалов на производственные нужды и является оправдательным документом для списания материальных ценностей со склада.

Скачать образец бланка форма М-8 в формате Word:


Скачать

Лимитно-заборная карта выписывается в двух экземплярах на одно наименование материала (номенклатурный номер). Один экземпляр до начала месяца передается структурному подразделению — потребителю материалов, второй — складу.

Отпуск материалов в производство осуществляется складом при предъявлении представителем структурного подразделения своего экземпляра лимитно-заборной карты.

Кладовщик отмечает в обоих экземплярах дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по номенклатурному номеру материала. В лимитно-заборной карте расписывается кладовщик, а в лимитно-заборной карте склада — представитель структурного подразделения.

Для сокращения количества первичных документов там, где это целесообразно, рекомендуется оформлять отпуск материалов непосредственно в карточках учета материалов (форма N М-17) . В этом случае расходные документы на отпуск материалов не оформляются, а сама операция производится на основании лимитных карт, выписываемых в одном экземпляре, и не имеющих значения бухгалтерских документов. Лимит отпуска можно указать и в самой карточке. Представитель структурного подразделения при получении материалов расписывается непосредственно в карточках учета материалов, а в лимитно-заборной карте расписывается кладовщик.

По лимитно-заборной карте ведется также учет материалов, не использованных в производстве (возврат). При этом никаких дополнительных документов не составляется.

Сверхлимитный отпуск материалов и замена одних видов материалов другими допускается только по разрешению руководителя организации, главного инженера или лиц, на это уполномоченных.

Изменение лимита производится теми же лицами, которым предоставлено право его установления.

Отпуск материальных ценностей производится с тех складов, которые обозначены в лимитно-заборной карте. Кладовщик отмечает в лимитно-заборной карте дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по каждому номенклатурному номеру материалов. Сдача складом лимитно-заборных карт в бухгалтерию производится после использования лимита.

Бланк лимитно-заборной карты с частично заполненными реквизитами может быть оформлен с помощью средств вычислительной техники.

Скачать другие бланки на нашем сайте:

Доверенность на авто Резюме Справка 2-НДФЛ Гостиничный бланк

Авансовый отчет АО-1

Материалы, имеющиеся на складах организации, отпускаются на производство, как правило, с учетом лимитов, которые устанавливаются, например, отделом снабжения. Лимитно-заборная карта входит в число первичных учетных документов, которыми оформляется такой отпуск.

Что такое лимиты

По каждому виду производства уполномоченными службами организации устанавливаются лимиты на отпуск материалов. Данные величины учитывают:

  • нормы расхода материалов;
  • производственные программы соответствующих подразделений организации;
  • количество материалов, остающихся на конец периода и переходящих на другой период.

Лимиты могут изменяться с разрешения уполномоченных лиц (разработчиков лимитов) в случаях:

  • уточнения объемов незавершенного производства, а также остатков материалов, которые не были использованы подразделениями организации;
  • перевыполнения и (или) изменения производственной программы;
  • изменения норм расхода;
  • замены материалов;
  • исправления ошибок, которые были допущены при расчете лимита, и т.д.

В случае выдачи материалов сверх лимита (на это также должно быть получено разрешение уполномоченного лица) на соответствующей документации ставится отметка «Сверх лимита» и указываются причины превышения лимита.

Сверхлимитный отпуск может осуществляться для:

  • возмещения забракованной продукции. В этом случае к первичной документации прилагаются сведения (акты) о браке;
  • покрытия факта перерасхода (сверх норм) материалов.

Лимитно-заборная карта

Отпуск материалов складами в подразделения организации оформляется при помощи лимитно-заборной карты по форме N М-8 , требования-накладной по форме N М-11 и накладной по форме N М-15 . Данные формы приведены в Постановлении Госкомстата России N 71а, принятого 30.10.1997. С 1 января 2013 г. они не являются обязательными к применению. Организация может утверждать собственные формы. Однако в этом случае последние должны иметь обязательные реквизиты, которые установлены законодательством (в частности Федеральным законом «О бухгалтерском учете» от 06.12.2011 N 402-ФЗ, ст. 9).

Лимитно-заборные карты применяются не только для отпуска материалов, но и для контроля в отношении соблюдения лимитов. Также по этому документу может быть произведен возврат на склад не использованных подразделениями материалов.

Отдел снабжения или другое уполномоченное подразделение выписывает лимитно-заборные карты, как правило, в двух или трех экземплярах. Один из них передается получателю (подразделению, которому отпускаются материалы), второй — на склад, а третий (если есть) остается в службе, выписавшей карту, для осуществления контроля.

В первых двух экземплярах карты лицо, ответственное за выдачу материалов, проставляет дату отпуска и количество отпущенных материалов. Получатель и кладовщик подтверждают данные сведения своими подписями.

В целях минимизации числа первичных учетных документов допускается оформлять отпуск материалов посредством карточек учета по форме М-17 . В таком случае лимитная карта составляется в одном экземпляре, получатель расписывается в получении в карточках складского учета, а в карте расписывается лицо, выдавшее материалы.

Обычно данные документы составляются на один месяц, но, если материалы отпускаются в небольшом количестве, карты могут быть выписаны на квартал.

Если складов несколько, лимитно-заборные карты составляются для каждого склада отдельно. Могут быть выданы только те материалы, с того склада и в том количестве, которые указаны в карте.

После израсходования лимита карты направляются в бухгалтерию для учета.

В компании для отражения списания материалов, когда происходит их систематическое использование согласно действующих лимитов, может оформляться такой бухгалтерский документ, как лимитно-заборная карта. Организация имеет право самостоятельно разрабатывать этот бланк или применять утвержденную Госкомстатом форму М-8. Сведения об этом отражаются в учетной политике.

Этот документ составляется на более чем одну операцию по выдаче МПЗ, и его период действия не должен превышать одного месяца. Он позволяет построить эффективный документооборот во время списания материалов, сокращая время на их выписку и отпуск.

К тому же лимитно-заборная карта форма м 8 позволяется контролировать расходование этих активов согласно действующим нормам. Ведь выдача сверхнормативного количества сырья и материалов производиться только с разрешения руководителя компании. Лимиты определяются на основе существующих норм расходов согласно плану и технологии производства.

При этом на дополнительное количество отпускаемых запасов оформляется отдельная требование-накладная.

Порядок применения

Форма М-8 выписывается бухгалтером в двух экземплярах, один передается кладовщику, производящему отпуск, другой -представителю цеха, в котором из МПЗ изготавливают продукцию. Выписку документа можно делать с использованием специализированных программ по бухучету, которые включают данный бланк.

Лимитка оформляется только на один вид МПЗ.

В течение определенного периода осуществляется выдача материалов согласно действующим нормативам. Для этого их получателю нужно предъявить соответствующему специалисту свой экземпляр документа, в котором делается запись о выданном объеме запасов. Каждый раз при этом должностные лица расписываются за их количество, которое было отпущено. Списание материалов фиксируется как в документе кладовщика, так и получателя.

Возврат неиспользованных материалов отражается на обороте карты. Его необходимо учитывать во время расчета оставшегося разрешенного количества запасов к выдаче.

При закрытии материального отчета, форма М8 лимитно заборная карта отражается в его расходной части и прикладывается к нему. Как только предыдущая лимитка закрывается, нужно выписать новый бланк. Этот бухгалтерский документ хранится на предприятии в течение 5 лет.

Как заполнить форму М-8

В карте указывается наименование фирмы, ее .

Документ должен иметь порядковый номер, а также дату его выписки.

В таблице нужно заполнить код операции (если применяется система кодирования), название вида деятельности получателя, а также указать структурные подразделения, которые являются отправителем и получателем материалов, счет учета затрат последнего, а также единицу выпускаемой продукции.

Далее записывается название МПЗ, его номенклатурный номер, код и наименование единицы измерения, в которой исчисляются его количество. Ответственное лицо в бланке определяет максимально разрешенное к выдаче материалов. Затем проставляется номер записи в карточке учета актива.

При закрытии карты в соответствующей графе указывается общее количество материалов, выданных за данный период, его цена и итоговая сумма без учета НДС.

При их отпуске кладовщик каждый раз отмечает в карте дату и количество выданных запасов, а также рассчитывает размер оставшегося лимита. Далее работник склада и получатель расписываются за их выдачу-прием в экземплярах друг друга.

Если остаются пустые строки в разделе «Отпущено», их необходимо прочеркнуть.

После изготовления готовой продукции могут остаться неизрасходованные материалы, их в конце рабочего дня отправляют обратно на склад. Возврат запасов отображается в графах «Возвращено» с проставлением даты и количества МПЗ. Лимит на следующий день должен их учитывать. Здесь также надо перечеркнуть оставшиеся не заполненными строчки.

Документ обязательно должен быть завизирован руководителем отдела, установившим лимит или же самим директором с указанием должности и личных данных.

Далее лимитно-заборную карту подписывается начальник цеха, при производстве в котором применяются отпущенные материалы, и кладовщик с расшифровкой их профессии и Ф.И.О. Также проставляется дата закрытия документа.

Лимитно-заборная карта необходима при оформлении отпуска товарно-материальных ценностей в подразделения организации (потребление: систематически или заранее разработанного лимита отпуска).

Щелкните, для увеличения

Ограничение устанавливает руководитель предприятия или лицо, уполномоченное на это приказом (например, начальник подразделения). Они могут вносить изменения в лимит. Выдача материалов сверхлимита осуществляется по разрешению данных лиц по отдельному требованию.

Рассчитывая лимит, необходимо использовать объемы производственных программ цехов, утвержденные нормы расхода материалов на единицу продукции.

Лимитно-заборная карта оформляется только на один вид товарно-материальных ценностей или на взаимозаменяемые материалы. При этом необходимо указать «Замена, смотреть требование №___ ».

Выписывается он работником бухгалтерии в двух экземплярах . Одна из которых передается в цех (участок), а второй на склад. Заполнять карту могут несколько человек.

Работник, который ее выписывает, должен указать:

  • Наименование организации,
  • Номер карты по порядку,
  • Дату,
  • Код операции движения товарно-материальных ценностей, если система кодирования применяется не предприятии,
  • Вид деятельности, для которой необходимы ТМЦ,
  • Отправителя (структурное подразделение, которое отпускает ТМЦ),
  • Получателя (подразделение, получающее материальные ценности),
  • Единицу измерения продукции,
  • Наименование ТМЦ, характеристику, сорт, марку, размер,
  • Номенклатурный номер (если их нет, то ставится прочерк),
  • Название, принятой поданному виду ТМЦ, единицы измерения (штуки, килограммы, метры и т.п.),
  • Код этой единицы.

В графе «Лимит» необходимо указать максимальное количество ТМС, которое может отпуститься. После этого карту визирует руководитель структурного подразделения, установивший лимит.

Бухгалтер заполняет следующее:

  • Синтетический счет и субсчет,
  • Код аналитического учета.
  • Цену без НДС.

Сотрудник, который получает ТМЦ показывает свой экземпляр карты кладовщику, который должен поставить дату отпуска, количество ТМЦ, остаток лимита на обоих экземплярах. Следует отметить, что кладовщик ставит подпись на экземпляре работника, а работник на экземпляре кладовщика.
Когда работник бухгалтерии окончательно обрабатывает карту, он считает стоимость всех отпущенных материальных ценностей за отчетный период без учета НДС.

Лимитно-заборная карта формы М-8: образец заполнения в 2019 году

Для чего нужна лимитно-заборная карта?

Лимитно-заборная карта — это первичный документ, с помощью которого регулируется отпуск материальных ценностей со склада компании на рабочие места, где производится продукция или выполняются работы.

Для чего нужна лимитно заборная карта? Различают три основные функции:

Чтобы понять назначение лимитно-заборной карты, расшифруем термин «лимит на отпуск материала». Лимиты определяются планово-расчетным способом, в основе которого лежат:

  • прогнозные показатели об объемах выпускаемой продукции;
  • нормы расхода материалов на единицу продукции.

Механизм разработки и пересмотра лимитов заключается в следующем:

О разнообразных лимитах, которые требуется учитывать в процессе хозяйственной деятельности, рассказываем в материалах:

Что включается в М-8 и кем она оформляется

Лимитно-заборная карта унифицированной формы М-8 объединяет несколько видов информации:

  • календарно-количественную: показывает, сколько единиц материальных ценностей в какие даты было выдано со склада; какой лимит установлен по данному виду материалов; каков остаток лимита после каждого отпуска материала;
  • учетную: содержит указание на корреспондирующий счет бухучета;
  • организационную: отражает данные об отправителе материала и его получателе, Ф.И.О. и подписи ответственных лиц.

Скачайте бланк лимитно-заборной карты формы М-8.

Вопрос о том, каким структурным подразделением оформляется лимитно-заборная карта, решается руководством предприятия. Из п. 100 приказа № 119н следует, что эти функции возлагаются на отдел снабжения или плановую службу.

Ознакомьтесь с образцом заполнения лимитно-заборной карты.

Образцы документов, используемых в повседневной жизни, приводятся в статьях:

Можно ли обойтись без М-8?

Унифицированный бланк лимитно-заборной карты М-8 для многих компаний не является первичным документом по учету и контролю за отпуском материальных ценностей. Это обусловлено несколькими факторами:

  • применение унифицированных форм первичных документов с 2013 года в бухучете перестало быть обязательным;
  • можно разрабатывать и применять свои формы первичных документов, учитывающих специфику работы предприятия;
  • многие предприятия не разрабатывают лимиты отпуска материалов, поэтому применение лимитно-заборных карт для них неактуально.

Лимитно-заборные карты по-прежнему применяются на предприятиях с крупным серийным производством, в строительной и транспортной отраслях. Процесс их оформления во многом автоматизирован с помощью специализированных учетных программ.

Учитывая, что отпуск материалов может быть оформлен непосредственно в карточках учета материалов (форма М-17), отказ от применения лимитно-заборной карты М-8 сокращает количество первичных документов по учету отпуска материалов и облегчает работу учетного персонала.

Применение современных методов автоматизации учетных процессов на предприятии ускоряет обработку первичной документации и позволяет в режиме реального времени получать полную информацию о поступлении материальных ценностей и их расходовании. Этот процесс может происходить по всем первичным документам, включая лимитно-заборные карты.

Как предпринимателю автоматизировать учетный процесс, рассказываем в материале «Программы для ведения бухгалтерии ИП на УСН».

***

Лимитно-заборные карты применяются для оформления отпуска материалов, систематически потребляемых при изготовлении продукции при установлении на предприятии лимитов отпуска, а также для текущего контроля за соблюдением установленных лимитов отпуска материалов на производственные нужды. Карта может оформляться на бланке унифицированной формы М-8 или на самостоятельно разработанном бланке.

***

Еще больше материалов по теме — в рубрике «Бухгалтерские документы».

Лимитно-заборная карта: образец заполнения

Отделы снабжения и другие подразделения устанавливают лимиты материалов, передаваемых на производство продукции. Чтобы оформить отпуск материалов, используется специальный документ – лимитно-заборная карта. Она заполняется по форме № М-8, установленной требованием Госкомстата в 1997 году. С 2013 г. заполнение именно этой формы не считается обязательным: предприятие может разработать свой вариант документации, однако в ней должна присутствовать та же информация. Перечень необходимых реквизитов закреплен законодательно.

Что такое лимиты

На каждом предприятии сотрудники уполномоченных подразделений устанавливают нормы отпуска материалов в соответствии со спецификой производства. Лимиты составляются на основе производственных программ, при их составлении учитывается норма расхода, а также числа материалов, которые остались неиспользованными в прошлом периоде и переходят на следующий период года.

В некоторых случаях по решению уполномоченных лиц величина лимитов может меняться. Это происходит в следующих случаях:

  • Изменение программы производства или перевыполнение плана. В этом случае лимит сокращается для уменьшения расходов.
  • Замена используемых материалов. Лимит пересчитывается с учетом специфики деятельности.
  • Уточнение остатков, не использованные в производственном процессе в прошлом периоде. Лимит отпуска сокращается для уменьшения количества невостребованных материалов.
  • Устранение ошибок, допущенных в процессе лимитов и выявлены позднее.

Материалы также могут быть отпущены сверх лимита, для этого необходимо получить разрешение уполномоченного сотрудника. Отпуск свыше запланированного лимита может использоваться для покрывания излишнего расхода материалов, а также для компенсации расходов из-за забракованной продукции. В подобных случаях необходимо приложить документацию, подтверждающую выявленный брак.

СКАЧАТЬ БЛАНК ЛИМИТНО-ЗАБОРНОЙ КАРТЫ

Заполнение лимитно-заборной карты

Лимитно-заборные карты заполняются для проверки объема отпуска материалов, а также для проверки следования установленным лимитным нормам. По такому документу оставшиеся неиспользованными материалы могут быть возвращены на складское хранение. Документ должен быть подготовлен отделом снабжения или другим подразделением предприятия в трех экземплярах:

  • Первый отправляется получателю вместе с отпущенными материалами.
  • Второй должен оставаться на складе.
  • Третий остается в уполномоченной службе для последующего контроля.

В карте необходимо указать дату выдачи, а также количество отпущенных материалов. Факт отпуска подтверждается подписями уполномоченного сотрудника склада (кладовщика) и получателя.

Предприятие имеет право уменьшить количество документации, для этого карта оформляется по форме М-17. В ней отражается та же информация, а получатель ставит подпись на карточке складского учета. На карте должна стоять подпись лица,уполномоченного отпускать материалы на производства. Карточка по форме М-17 заполняется в единственном экземпляре.

Периодичность заполнения карты

Обычно лимитно-заборная карта составляется ежемесячно, однако если речь идет о небольших партиях материалов, то она может заполняться ежеквартально. Если материал поступает на производственный участок с нескольких складов, то для каждого из них карта оформляется персонально – в ней прописывается количество выданных материалов, дата получения и ставится подпись уполномоченного лица. После того как материалы будут израсходованы, лимитная карта передается в бухгалтерию предприятия для контроля.

 Лимитно-заборную карту оформляют, когда в организации утвержден лимит отпуска материалов в производство. Составляют карту только на один вид материалов. При каждом отпуске материалов в карту вносят записи о количестве отпущенного материала и об остатке лимита. Отпуск материалов по лимитно-заборной карте производят только с одного склада, указанного в карте.  СКАЧАТЬ ОБРАЗЕЦ ЗАПОЛНЕНИЯ ЛИМИТНО-ЗАБОРНОЙ КАРТЫ

Межотраслевая форма м 8. Лимитно заборная карта

Регулярное использование материалов и применение норм расхода (лимитов) является поводом для оформления отпуска с помощью лимитно-заборной карты форма М-8, бланк и образец заполнения которой можно скачать ниже. Правильный учет отпускаемых лимитов некоторых видов МЦ является необходимой процедурой для правильного исчисления налогооблагаемой прибыли. ФНС в процессе проверки указанных расходов обычно запрашивает данные карты, а потому организация обязан их заполнять.

Для того чтобы установить лимиты потребления отдельных наименований отдел экономистов проводит соответствующую аналитику, расчеты, после чего результаты согласовываются с руководством. Потреблять лимитируемые материалы можно только в пределах установленных нормативов, сверхлимитное потребление требует дополнительного согласование с руководством.

Организация, имеющая материалы, для которых установлены лимиты, должна заполнять лимитно-заборные карты. Госкомстатом подготовлена унифицированная форма М-8, которую предприятию нужно заполнять в двойном экземпляре на один тип материальных ценностей. Первый заполненный образец лимитно-заборной карты сдается в производственный цех (принимающей стороне), второй ответственный представитель склада оставляет у себя.

Лимитно-заборную карту можно не заполнять, если для материалов нормы расходования не установлены. В этом случае внутренний отпуск со склада оформляют , а отпуск на сторону — .

Образец заполнения формы М-8

Порядок заполнения лимитно-заборной карты М-8:

  • В верхнюю строку вписывается название предприятия;
  • далее присваивают номер бланку — не следует повторять номер в течение года;
  • в небольшой таблице вверху форму М-8 заполняют дату составления документа, код операции и вид деятельности, наименования структурных подразделений передающей и принимающей стороны, счет, куда отпускаются лимитируемые ценности, а также учетная единица выпускаемой продукции, в которой применяется данный вид материалов;
  • в нижней таблице бланка лимитно-заборной карты вносится название материала, его № по складской номенклатуре, а также единица, в которой он измеряется. Всю эту информацию можно найти в ;
  • поле «лимит» заполняется информацией о наибольшем количестве отпускаемой позиции, данная строка позволяет контролировать отпуск.

Цена без учета добавленного налога заполняется бухгалтером, ответственным за учет материалов на предприятии.

Лимитно-заборная карта должна присутствовать у кладовщика и представителя цеха, в момент отпуск материалов со склада в цех в лимитно-заборной карте ставится дата данной операции, количество передаваемых ценностей, остаток лимита.

Заполненная в форме М-8 информация заверяется обеими сторонами: кладовщик ставит свою подпись в экземпляре представителя цеха, в последний наоборот — в экземпляре кладовщика.

Заполнение бланка М-8 проводится каждый раз, когда материалы, для которых установлен лимит потребления, передаются со склада в цех. Когда установленный лимит будет исчерпан, лимитно-заборная карта сдается в бухгалтерию.

Руководители структурных подразделений принимающей и отпускающей стороны должны поставить свои подписи на заполненном образце лимитно-заборной карты. Далее документ хранится в бухгалтерии на протяжении пяти лет.

Лимитно-заборная карта нужна для оформления отпуска товарно-материальных ценностей ТМЦ в подразделениях организации (потребление: регулярно или заранее разработанного лимита на отпуск).

Ограничения устанавливает руководитель организации или лицо, которое уполномочено на это приказом (к примеру, начальник подразделения). Они так же могут менять лимит. Сверхлимитная выдача материалов осуществляется с разрешения данных лиц по отдельному выдвинутому требованию.

Рассчитывая лимит, нужно учитывать производственные объемы программ цехов, утвержденные нормы расхода материала на единицу продукции.

Оформляется лимитно-заборная карта только на один тип товарно-материальных ценностей или же на взаимозаменяемые материалы. При этом нужно прописать «Замена, смотреть требование №___».

Работник бухгалтерии выписывает его в двух экземплярах. Один, из которых передается на склад, а второй в цех (участок). Карту могут заполнять несколько человек.

Сотрудник, выписывающий ее, должен написать:

  • Номер карты по порядку,
  • Наименование организации,
  • Дату,
  • Вид деятельности, для которой необходимы товарно-материальные ценности,
  • Код операции движения ТМЦ, если система кодирования применяется на предприятии,
  • Отправителя (структурное подразделение, отпускающее ТМЦ),
  • Получателя (подразделение, которое получает ТМЦ),
  • Единицы измерения продукции,
  • Название ТМЦ, характеристика, сорт, марка, размеры,
  • Номенклатурный номер (в случае его отсутствия, ставится прочерк),
  • Наименование, принятых по данному виду материальных ценностей, единиц измерения (килограммы, штуки, метры и т.д.),
  • Код единицы.

Графа «Лимит» предусматривает написание указания максимального количества ТМС, которые могут отпускаться. После чего карту подписывает руководитель структурного подразделения, установившего лимит.

Бухгалтер должен заполнить следующее:

  • Синтетический субсчет и счет,
  • Код аналитического учета.
  • Стоимость без НДС.

Работник, получающий ТМЦ, предъявляет свой экземпляр этой карты кладовщику, который обязан указать дату отпуска, число ТМЦ, остаток лимита на этих экземплярах. Нужно отметить, что кладовщик подписывает экземпляр работника, а работник ставит подпись на экземпляре кладовщика. После окончательной обработки карты работником бухгалтерии, просчитывается стоимость всех выданных ТМЦ без учета НДС за весь отчетный период.

Лимитно-заборная карта подписывается руководителями подразделений, которые отпускают товарно-материальные ценности и, которые их принимают обратно. Стандартный срок хранения карты устанавливается в пять лет.

Бланк Лимитно-заборной карты по форме № М-8 применяется при наличии лимитов отпуска материалов для оформления отпуска материалов, систематически потребляемых при изготовлении продукции, а также для текущего контроля за соблюдением установленных лимитов отпуска материалов на производственные нужды и является оправдательным документом для списания материальных ценностей со склада.

Лимитно-заборная карта выписывается в двух экземплярах на одно наименование материала (номенклатурный номер). Один экземпляр до начала месяца передается структурному подразделению — потребителю материалов, второй — складу.

Отпуск материалов в производство осуществляется складом при предъявлении представителем структурного подразделения своего экземпляра лимитно-заборной карты.

Кладовщик отмечает в обоих экземплярах дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по номенклатурному номеру материала. В лимитно-заборной карте расписывается кладовщик, а в лимитно-заборной карте склада — представитель структурного подразделения.

Для сокращения количества первичных документов там, где это целесообразно, рекомендуется оформлять отпуск материалов непосредственно в карточках учета материалов (форма № М-17). В этом случае расходные документы на отпуск материалов не оформляются, а сама операция производится на основании лимитных карт, выписываемых в одном экземпляре, и не имеющих значения бухгалтерских документов. Лимит отпуска можно указать и в самой карточке. Представитель структурного подразделения при получении материалов расписывается непосредственно в карточках учета материалов, а в лимитно-заборной карте расписывается кладовщик.

По лимитно-заборной карте ведется также учет материалов, не использованных в производстве (возврат). При этом никаких дополнительных документов не составляется.

Сверхлимитный отпуск материалов и замена одних видов материалов другими допускается только по разрешению руководителя организации, главного инженера или лиц, на это уполномоченных.

Изменение лимита производится теми же лицами, которым предоставлено право его установления.

Отпуск материальных ценностей производится с тех складов, которые обозначены в лимитно-заборной карте. Кладовщик отмечает в лимитно-заборной карте дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по каждому номенклатурному номеру материалов. Сдача складом лимитно-заборных карт в бухгалтерию производится после использования лимита.

Бланк лимитно-заборной карты с частично заполненными реквизитами может быть оформлен с помощью средств вычислительной техники.

Более подробно, порядок работы с лимитно-заборной картой рассмотрен в разделе справочника «

Лимитно-заборная карта


(форма N М-8)

Применяется при наличии лимитов отпуска материалов для оформления отпуска материалов, систематически потребляемых при изготовлении продукции, а также для текущего контроля за соблюдением установленных лимитов отпуска материалов на производственные нужды и является оправдательным документом для списания материальных ценностей со склада.

Лимитно-заборная карта выписывается в двух экземплярах на одно наименование материала (номенклатурный номер). Один экземпляр до начала месяца передается структурному подразделению — потребителю материалов, второй — складу.

Отпуск материалов в производство осуществляется складом при предъявлении представителем структурного подразделения своего экземпляра лимитно-заборной карты.

Кладовщик отмечает в обоих экземплярах дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по номенклатурному номеру материала. В лимитно-заборной карте расписывается кладовщик, а в лимитно-заборной карте склада — представитель структурного подразделения.

Для сокращения количества первичных документов там, где это целесообразно, рекомендуется оформлять отпуск материалов непосредственно в карточках учета материалов (форма N М-17). В этом случае расходные документы на отпуск материалов не оформляются, а сама операция производится на основании лимитных карт, выписываемых в одном экземпляре, и не имеющих значения бухгалтерских документов. Лимит отпуска можно указать и в самой карточке. Представитель структурного подразделения при получении материалов расписывается непосредственно в карточках учета материалов, а в лимитно-заборной карте расписывается кладовщик.

По лимитно-заборной карте ведется также учет материалов, не использованных в производстве (возврат). При этом никаких дополнительных документов не составляется.

Сверхлимитный отпуск материалов и замена одних видов материалов другими допускается только по разрешению руководителя организации, главного инженера или лиц, на это уполномоченных.

Изменение лимита производится теми же лицами, которым предоставлено право его установления.

Отпуск материальных ценностей производится с тех складов, которые обозначены в лимитно-заборной карте. Кладовщик отмечает в лимитно-заборной карте дату и количество отпущенных материалов, после чего выводит остаток лимита по каждому номенклатурному номеру материалов. Сдача складом лимитно-заборных карт в бухгалтерию производится после использования лимита.

Бланк лимитно-заборной карты с частично заполненными реквизитами может быть оформлен с помощью средств вычислительной техники.

Лимитно-заборная карта необходима при оформлении отпуска товарно-материальных ценностей в подразделения организации (потребление: систематически или заранее разработанного лимита отпуска).

Щелкните, для увеличения

Ограничение устанавливает руководитель предприятия или лицо, уполномоченное на это приказом (например, начальник подразделения). Они могут вносить изменения в лимит. Выдача материалов сверхлимита осуществляется по разрешению данных лиц по отдельному требованию.

Рассчитывая лимит, необходимо использовать объемы производственных программ цехов, утвержденные нормы расхода материалов на единицу продукции.

Лимитно-заборная карта оформляется только на один вид товарно-материальных ценностей или на взаимозаменяемые материалы. При этом необходимо указать «Замена, смотреть требование №___ ».

Выписывается он работником бухгалтерии в двух экземплярах . Одна из которых передается в цех (участок), а второй на склад. Заполнять карту могут несколько человек.

Работник, который ее выписывает, должен указать:

  • Наименование организации,
  • Номер карты по порядку,
  • Дату,
  • Код операции движения товарно-материальных ценностей, если система кодирования применяется не предприятии,
  • Вид деятельности, для которой необходимы ТМЦ,
  • Отправителя (структурное подразделение, которое отпускает ТМЦ),
  • Получателя (подразделение, получающее материальные ценности),
  • Единицу измерения продукции,
  • Наименование ТМЦ, характеристику, сорт, марку, размер,
  • Номенклатурный номер (если их нет, то ставится прочерк),
  • Название, принятой поданному виду ТМЦ, единицы измерения (штуки, килограммы, метры и т.п.),
  • Код этой единицы.

В графе «Лимит» необходимо указать максимальное количество ТМС, которое может отпуститься. После этого карту визирует руководитель структурного подразделения, установивший лимит.

Бухгалтер заполняет следующее:

  • Синтетический счет и субсчет,
  • Код аналитического учета.
  • Цену без НДС.

Сотрудник, который получает ТМЦ показывает свой экземпляр карты кладовщику, который должен поставить дату отпуска, количество ТМЦ, остаток лимита на обоих экземплярах. Следует отметить, что кладовщик ставит подпись на экземпляре работника, а работник на экземпляре кладовщика.
Когда работник бухгалтерии окончательно обрабатывает карту, он считает стоимость всех отпущенных материальных ценностей за отчетный период без учета НДС.

% PDF-1.7 % 823 0 объект > эндобдж xref 823 76 0000000016 00000 н. 0000003210 00000 н. 0000003420 00000 н. 0000003455 00000 н. 0000004647 00000 н. 0000004682 00000 н. 0000004832 00000 н. 0000004984 00000 н. 0000005121 00000 н. 0000005263 00000 п. 0000005713 00000 н. 0000006161 00000 п. 0000006198 00000 н. 0000006310 00000 н. 0000006424 00000 н. 0000006451 00000 п. 0000007118 00000 н. 0000007781 00000 н. 0000007808 00000 н. 0000008065 00000 н. 0000008467 00000 н. 0000008745 00000 н. 0000009222 00000 п. 0000010677 00000 п. 0000011179 00000 п. 0000011454 00000 п. 0000011950 00000 п. 0000013272 00000 п. 0000014495 00000 п. 0000016477 00000 п. 0000016609 00000 п. 0000017036 00000 п. 0000017661 00000 п. 0000017688 00000 п. 0000017939 00000 п. 0000018413 00000 п. 0000019799 00000 п. 0000021063 00000 п. 0000021202 00000 п. 0000022507 00000 п. 0000022916 00000 п. 0000024192 00000 п. 0000076007 00000 п. 0000076290 00000 н. 0000076845 00000 п. 0000079495 00000 п. 0000079565 00000 п. 0000108953 00000 п. 0000109023 00000 п. 0000109164 00000 п. 0000142629 00000 н. 0000173552 00000 н. 0000173823 00000 н. 0000204394 00000 н. 0000205038 00000 н. 0000205108 00000 н. 0000239078 00000 н. 0000272558 00000 н. 0000272823 00000 н. 0000273196 00000 н. 0000273513 00000 н. 0000274119 00000 н. 0000274265 00000 н. 0000274342 00000 н. 0000274448 00000 н. 0000274524 00000 н. 0000274594 00000 н. 0000274706 00000 н. 0000294355 00000 н. 0000294630 00000 н. 0000294930 00000 н. 0000294957 00000 н. 0000295351 00000 п. 0000330528 00000 н. 0000003012 00000 н. 0000001852 00000 н. трейлер ] / Назад 5

/ XRefStm 3012 >> startxref 0 %% EOF 898 0 объект > поток hb«b` P ̀

Общая информация о форме M8 S Corporation в Миннесоте

Платежи

Существует четыре типа налоговых платежей, которые может производить S-корпорация: продление, расчетный налог, налоговая декларация и исправленные возвратные платежи.Вы можете заплатить электронным способом, кредитной или дебетовой картой или чеком. (См. Варианты оплаты выше.)

Примечание. Если в настоящее время вы платите электронным способом с использованием метода кредита ACH, продолжайте звонить в свой банк в обычном режиме. Если вы хотите производить платежи с использованием метода кредитования ACH, инструкции доступны на нашем веб-сайте www.revenue.state.mn.us.

Дополнительный платеж

Ваш налог подлежит уплате в установленный срок, даже если вы подаете заявление на продление. Любой налог, не уплаченный в установленный срок, подлежит начислению пени и пени (см. Строки 16 и 17 на стр. 5).

Если вы подаете заявку после установленного срока, вы можете избежать штрафов и пени, произведя продленный платеж до установленного срока. См. Раздел «Варианты оплаты» выше. Если вы платите чеком, отправьте заполненную форму PV81 вместе с платежом.

Расчетные налоговые платежи

Корпорация S должна производить ежеквартальные расчетные налоговые платежи, если сумма ее расчетных налогов на корпорацию S, минимального сбора, удержания нерезидентов и комбинированного подоходного налога для всех акционеров-нерезидентов, решивших участвовать в комбинированном подоходном налоге, за вычетом любых кредитов, составляет 500 долларов США или более.

Платежи подлежат оплате до 15 числа четвертого, шестого и девятого месяцев налогового года и первого месяца после окончания
налогового года. Если срок уплаты
приходится на выходной или официальный праздник, платежи, произведенные электронным способом или почтовые штемпели на следующий рабочий день, считаются своевременными.

Если расчетный налог требуется для корпоративных налогов / минимальных сборов S, сводного подоходного налога и / или удержания нерезидентов, включите все в одни и те же ежеквартальные платежи.

Чтобы произвести ориентировочную оплату, см. «Варианты оплаты» выше.Если вы платите чеком, отправьте вместе с платежом заполненную форму M72.

Для получения дополнительной информации см. Инструкции S Corporation по расчетному налогу.

Уплата налоговой декларации

Если в строке 19 формы M8 указана сумма к оплате, вы должны внести платеж по налоговой декларации (см. «Варианты оплаты» выше). Если от вас не требуется платить электронным способом, вы можете оплатить чеком и отправить заполненную форму PV40 вместе с платежом.

Пени и проценты

Просроченная оплата

Штраф за просрочку платежа начисляется по любому налогу, не уплаченному в установленный срок.Штраф составляет 6 процентов от неуплаченного налога.

Если вы подадите декларацию после установленной даты платежа с остатком на счете, на сумму неуплаченного налога будет наложен дополнительный штраф в размере 5 процентов.

Поздняя подача

Существует также штраф, если вы подадите заявление после продленного срока и задолженность по налогу. Штраф за несвоевременную подачу составляет 5 процентов от суммы любого налога, не уплаченного в установленный срок.

Проценты

Вы также должны уплатить проценты по пени и налогу, которые вы отправляете поздно.Процентная ставка на 2012 год — 3 процента.

Прочие штрафы

Существуют также гражданские и уголовные наказания за умышленное непредоставление декларации Миннесоты, уклонение от уплаты налогов и за подачу необоснованной, ложной или мошеннической декларации.

Напоминания о подаче документов

Отчетный период

Для Миннесоты вы должны использовать тот же отчетный период, что и для федеральной декларации. Если вы измените свой федеральный отчетный период, приложите копию федеральной формы 1128 «Заявление об усыновлении, изменении или сохранении налогового года» к краткосрочной декларации штата Миннесота.

Совокупный налог на прибыль

Корпорация S может уплачивать сводный подоходный налог Миннесоты от имени своих акционеров-нерезидентов, которые выбирают включение вместо каждого акционера, подающего свою собственную налоговую декларацию Миннесоты. Избирающие лица не должны иметь никаких источников дохода в Миннесоте, кроме дохода от этой корпорации S и других организаций, выбирающих составную регистрацию.

Если вы платите сводный подоходный налог для своих избранных акционеров, отметьте поле для сводного подоходного налога в начале формы M8 и просмотрите инструкции в строке 3 на странице 4.

Нерезиденты, включенные в сводный налог на прибыль, не подпадают под требования нерезидентов по удержанию (см. Следующий раздел).

Удержание налогов для нерезидентов

Корпорации

S обязаны удерживать подоходный налог штата Миннесота с акционера-нерезидента, если акционер:

  • имеет юридическое место жительства за пределами Миннесоты;
  • не включается в сводный налог на прибыль;
  • имеет распределительный доход в Миннесоте в размере 1000 долларов или более от этой корпорации S; и
  • имеет доход, который не был получен в результате операции, связанной с прекращением или ликвидацией корпорации S, в которой в текущем или предыдущем налоговом году не были распределены денежные средства или имущество.

Если вы обязаны платить нерезидентам с холдингом, см. Инструкции в строке 4 на странице 4.

Артисты-иногородние

Компенсация, выплачиваемая нерезиденту развлекательной организации за выступления в Миннесоте, не подлежит обложению подоходным налогом Миннесоты.

Вместо этого компенсация подлежит обложению налогом у источника в размере 2 процентов от валовой компенсации, которую развлекательная организация получает за выступления в Миннесоте.

Корпорация S является развлекательной организацией, если ей выплачивается компенсация за развлечения, предоставленные артистами, которые являются акционерами.Артист включает, например, музыканта, певца, танцора, комика, актера, спортсмена или оратора. Если вы определены законом как предприятие, занимающееся развлечениями, подайте форму ETR, Налоговая декларация нерезидента, работающего в сфере развлечений, до 15 апреля следующего года, когда был зарегистрирован доход. Для получения дополнительной информации см. Информационный бюллетень об удержании налогов 11, Налог на работников индустрии развлечений-нерезидентов.

Если вы являетесь развлекательной организацией, которая получила компенсацию за выступления в Миннесоте и не имеете другого дохода в Миннесоте, вам не требуется подавать форму M8.

Использование информации

Вся информация в этой форме является частной, за исключением вашего идентификационного номера налогоплательщика Миннесоты, который является общедоступным. Личная информация не может быть передана другим лицам, кроме случаев, предусмотренных законодательством штата.

Личность и информация о доходах акционеров требуются в соответствии с законодательством штата, чтобы департамент мог определить правильный налогооблагаемый доход акционера в Миннесоте и проверить, подал ли акционер декларацию и уплатил ли налог. Номера социального страхования акционеров требуются в M.С. 289А.12, подраздел. 13.

Возврат бумаги для сборки

Расположите свои расписания в Миннесоте в том порядке, в котором они были выполнены, и поместите их позади формы M8. Затем поместите свой федеральный отчет и его графики за материалами Миннесоты. Не прикрепляйте к возвратной коробке какие-либо корпуса скрепками и липкой лентой.

Отчетность о федеральных изменениях

Если Налоговая служба (IRS) изменяет или проверяет вашу федеральную налоговую декларацию или вы вносите поправки в федеральную налоговую декларацию, и это влияет на вашу налоговую декларацию из Миннесоты или федеральные таблицы K-1, вы должны внести поправки в свою налоговую декларацию.Подайте форму M8X в течение 180 дней после того, как вы получите уведомление от ИХ или после того, как вы подали федеральную налоговую декларацию с поправками. Приложите копию отчета IRS или измененную федеральную декларацию к измененной декларации Миннесоты.

Если изменения не повлияют на ваш доход в Миннесоте или график K-1, у вас есть 180 дней на то, чтобы отправить в департамент объяснительное письмо. Отправьте свое письмо и полную копию исправленной федеральной декларации или уведомления об исправлении по адресу: Minnesota S Corporation Tax, Mail Station 5170, St.Пол, MN 55146-5170.

Если вы не предоставите отчет в соответствии с требованиями, любой дополнительный налог будет начислен 10-процентным штрафом.

Годовая отчетность по всем налоговым льготам JOBZ

Каждый квалифицированный бизнес, участвующий в зоне JOBZ, должен ежегодно подавать две формы в Департамент доходов, которые дополняют и отделяются от налоговой декларации квалифицированного бизнеса.

  1. К 15 октября 2012 г. каждый квалифицированный бизнес должен заполнить форму M500 «Отчет о налоговых льготах JOBZ», чтобы указать сумму налогов, которые компания уплатила бы в 2011 году, если бы она не находилась в зоне JOBZ.
  2. До 15 октября 2012 г. каждый квалифицированный бизнес должен заполнить форму JOBZ1, «Сертификат соответствия JOBZ соглашению о субсидии для бизнеса», чтобы удостоверить департамент, что он соблюдает условия соглашения о субсидии для бизнеса.

Непредставление любого из этих отчетов приведет к исключению компании из программы JOBZ.

Это часть серии сообщений об инструкциях M8 корпорации S.

S Корпоративные налоги | Форма M8 Инструкция

Перед заполнением формы M8 вы должны заполнить следующее; вам нужно будет сослаться на них:

  • федеральные графики поддержки песков формы 1120 и
  • График KS для каждого акционера-нерезидента и любого акционера из Миннесоты, у которого есть корректировки дохода (см. Стр. 10).

Флажки

Первоначальный возврат

Если это первая декларация корпорации S, поданная в Миннесоте, отметьте поле в передней части формы.

Совокупный налог на прибыль

Если вы платите сводный подоходный налог для своих избранных акционеров, отметьте поле для сводного подоходного налога в начале своей налоговой декларации и ознакомьтесь с инструкциями к строке 3.

Финансовые учреждения

Если вы финансовое учреждение, выбирающее

, чтобы облагаться налогом как S-корпорация для федеральных целей, отметьте поле на лицевой стороне формы.

Квалифицированная дочерняя компания подраздела S (QSSS)

Если вы включаете в эту декларацию квалифицированную дочернюю компанию подраздела S (QSSS), установите флажок на лицевой стороне вашей формы M8.

Если материнская корпорация S связана с Миннесотой, вы должны использовать федеральный идентификационный номер и идентификационный номер штата. Если у родителя нет нексуса, заполните форму M8 под федеральным идентификационным номером и идентификационным номером штата в QSSS с нексусом в Миннесоте. В любом случае полная копия федеральной формы 1120S должна быть приложена к декларации Миннесоты.

См. Трехфакторную формулу для файловых систем QSSS на стр. 7 для получения дополнительной информации.

Квалифицированный бизнес, участвующий в зоне JOBZ

Если вы являетесь квалифицированным бизнесом, участвующим в зоне JOBZ в Миннесоте, и вся ваша собственность и платежная ведомость находятся в пределах этой зоны, вы не обязаны платить минимальную плату. Установите флажок на лицевой стороне формы M8.

Out of Business (окончательный возврат)

Если корпорация S не работает и не обязана подавать форму M8 в последующие годы, отметьте поле «Out of Business» на лицевой стороне формы.

Если вы отметили поле «техническое прекращение» в своей федеральной форме 1120S, вы должны приложить копию своего федерального декларации к форме M8.

Линейные инструкции

Раунд составляет целые доллары. Уменьшение составляет менее 50 центов и увеличивается на 50 центов или более до следующего более высокого доллара.

Корпоративные партнеры

При заполнении формы M8 и приложений KS обязательно укажите

любые суммы, указанные в Графике KPC, который вы получили как партнер партнерства (включите График KPC в свой возврат).

Строка 1 — Корпоративные налоги S

Введите сумму следующих S корпоративных налогов в строке 1 и отметьте соответствующие поля, чтобы указать включенные типы налогов. Покажите подробную информацию по каждому типу налога и проценту, относящемуся к Миннесоте. Умножьте эту сумму на 9,8 процента (0,098) — ставку корпоративного налога — для определения вашего налога в Миннесоте. Для каждого налога приложите отдельный график с указанием ваших расчетов.

  • Определите налог на часть пассивного дохода штата Миннесота, облагаемую федеральным налогом.Приложите копию федерального графика, используемого для расчета вашего федерального налога.
  • Определите налог на долю Миннесоты признанной встроенной прибыли и чистой прибыли с капитала, подлежащей обложению федеральным налогом.
  • Если корпорация S платит налог на возврат по LIFO (рассчитанный за последний год, когда корпорация была корпорацией C) за четырехлетний период, включите взнос этого года.

Строка 2 — Минимальная комиссия

Заполните M8A формы M8, чтобы определить минимальную плату для ввода в строке 2.См. Инструкции M8A, начинающиеся на странице 7.

Вы освобождены от минимального сбора, если вы являетесь квалифицированным бизнесом, участвующим в зоне JOBZ в Миннесоте, и вся ваша собственность и платежная ведомость находятся в пределах этой зоны.

Строка 3 — Совокупный налог на прибыль

Чтобы определить строку 3, вы должны сначала подсчитать сумму сводного налога, относящуюся к каждому избирающему акционеру. См. Инструкции для строки 34 расписания KS на стр. 12.

Добавьте совокупный подоходный налог, относящийся ко всем избирающим акционерам (сумма строк 34 из всех таблиц KS), и введите результат в строку 3 формы M8.

Строка 4 — Удержание нерезидентов

Чтобы определить строку 4, вы должны сначала определить сумму удержания для каждого акционера-нерезидента. См. Инструкции для строки 35 расписания KS на стр. 12.

Добавьте удержание, требуемое для всех акционеров-нерезидентов (сумма строк 35 из всех таблиц KS), и введите результат в строку 4 формы M8.

Если вы получили подписанную и датированную форму AWC (Альтернативный сертификат удержания) от одного или нескольких акционеров, отметьте поле в строке 4 формы M8.При подаче декларации вы должны приложить сертификат (ы).

Строка 6 — Кредит для транзитного пропуска работодателя

Если вы предоставили своим сотрудникам проездные билеты по сниженной цене для использования в Миннесоте, заполните и приложите График EtP, Кредит для транзитного пропуска работодателя.

Введите сумму кредита, которая запрашивается непосредственно корпорацией S и не передается акционерам.

Строка 6 не может превышать сумму налогов корпорации S и минимальный сбор (сумма строк 1 и 2).

Строка 8 — Фонд дикой природы Миннесоты Nongame

Вы можете помочь сохранить редких и находящихся под угрозой исчезновения животных и растений Миннесоты, сделав пожертвование в этот фонд. Ваше пожертвование будет добавлено к вашей общей сумме налога и уменьшит размер возмещения или увеличит причитающийся остаток. Пожертвованные средства подлежат вычету в следующем году.

Для получения дополнительной информации посетите веб-сайт Министерства природных ресурсов Миннесоты www.dnr.state.mn.us.

Строка 10 — Кредит корпоративной зоны

Если ваш бизнес был сертифицирован и одобрен Департаментом Миннесоты

Закона о занятости и экономическом развитии (DEED) в качестве собственности для трудоустройства в зоне предприятия, введите кредит, который запрашивается непосредственно корпорацией S и не передается акционерам.Приложите график EPC.

Для получения подробной информации о зонах посетите сайт DEED по адресу www.positivelyminnesota.com.

, строка 11 — JOBZ Jobs Credits

Возмещаемый кредит на рабочие места, основанный на более высокооплачиваемой работе, предоставляется квалифицированным предприятиям, работающим в зоне JOBZ. Квалифицированный бизнес должен подписать с администратором зоны Соглашение о бизнес-субсидии. Заполните и приложите Таблицу налоговых льгот JOBZ, JOBZ.

Введите общий кредит рабочих мест, который запрашивается непосредственно корпорацией S и не передается акционерам.

Для получения подробной информации о зонах посетите сайт DEED по адресу www.positivelyminnesota.com.

Строка 12 — Кредит для тестирования на туберкулез крупного рогатого скота

Если вы владеете крупным рогатым скотом в Миннесоте и в течение года понесли расходы на проверку своего скота на туберкулез, вы можете претендовать на получение кредита в размере 25 процентов от ваших общих расходов. чтобы определить строку 12, выполните следующие действия:

  • Расходы, понесенные вами на проведение тестирования на туберкулез вашего крупного рогатого скота в Миннесоте
  • Кредит ограничен 25% (.25) ваших расходов. . . . . . .
  • Умножить шаг 1 на шаг 2. . . . . . .

Введите результат шага 3 в строку 12. Вы не можете передать этот кредит своим акционерам.

Расходы, понесенные в течение календарного года, когда тестирование крупного рогатого скота на туберкулез в Миннесоте не требуется на федеральном уровне, не допускаются при подаче заявки на кредит.

Строка 13 — Расчетные налоговые и дополнительные платежи

Введите общую сумму предоплаты, в том числе:

  • ваши общие расчетные налоговые платежи за 2011 г., произведенные в 2011 и 2012 гг., Уплаченные электронным способом или с помощью формы M72;
  • любой платеж за продление на 2011 год, уплаченный электронным способом или с помощью PV81, который был произведен в установленный срок при подаче заявления о продлении; или
  • часть вашего возмещения за 2010 год, примененная к расчетному налогу за 2011 год.

Строка 16 — Штраф

Штрафы взимаются как часть налога в дополнение к любым дополнительным расходам за недоплату расчетного налога. Если вы платите налог после установленной даты платежа, укажите соответствующие штрафы в строке 16.

Просроченная оплата

Если налог не уплачен в установленный срок, взимается штраф в размере 6 процентов от неуплаченного налога в строке 15.

Поздняя подача

Если вы подаете декларацию после продленного срока и имеете задолженность по налогу, вы должны заплатить штраф за просрочку подачи.Штраф за просрочку подачи документов составляет 5 процентов от неуплаченного налога в строке 15.

Остаток не выплачен

Если вы подаете декларацию после установленной даты и задолжали налог, взимается дополнительный штраф. Дополнительный штраф составляет 5 процентов от неуплаченного налога в строке 15.

Способ оплаты

Если вы обязаны платить электронным способом, но не платите, то к платежам, совершенным не электронным способом, применяется дополнительный штраф в размере 5 процентов, даже если ваш бумажный чек отправлен вовремя.

Строка 17 — Проценты

Вы должны платить проценты по неуплаченному налогу и штрафу с установленной даты до полной выплаты суммы.Процентная ставка на 2012 календарный год составляет 3 процента.

Чтобы определить размер вашей задолженности по процентам, используйте следующую формулу с соответствующей процентной ставкой:

Проценты =
(налог + штраф) x количество дней просрочки x процентная ставка ÷ 365

Строка 18 — Дополнительный сбор за недоплату расчетного налога

Если вы не уплатили правильную сумму расчетного налога к установленному сроку, вам, возможно, придется заплатить дополнительный сбор за недоплату или неуплату расчетного налога.

Вам также может быть присужден дополнительный сбор, если сумма строк 1 и 2 (за вычетом любых кредитов в строках с 10 по 13), комбинированный подоходный налог в строке 2 или удержание нерезидента в строке 3 превышает 500 долларов.

Заполните график EST, Дополнительный сбор за недоплату расчетного налога, чтобы определить дополнительный сбор за недоплату расчетного налога. Вычислите сумму недоплаты отдельно для корпоративных налогов / минимального сбора S и для каждого акционера-нерезидента, имеющего 500 долларов или более совокупного дохода или удерживаемого налога-нерезидента.

Введите общую сумму, если таковая имеется, в строке 18. Приложите график к вашему отчету.

Строка 19 — Сумма задолженности

Добавьте строки с 15 по 18. Это сумма вашей задолженности по налогу. Обязательно установите соответствующий флажок в строке 19, чтобы указать способ оплаты. См. Варианты оплаты на стр. 2.

Строка 20 — Переплата

Если строка 14 меньше суммы строк 9 и 18, вычтите строку 14 из суммы строк 9 и 18. Введите результат в строку 19 и введите ноль в строку 20.

Если у вас есть переплата, вы можете выбрать ее прямое перечисление на свой банковский счет. Вы также можете применить всю или часть переплаты к расчетному налоговому счету за 2012 год.

Строка 21–2012 Расчетный налог

Пропустите эту строку, если вы задолжали дополнительный налог.

Если вы платите расчетный налог за 2012 год, вы можете полностью или частично отнести сумму возмещения к расчетному налогу за 2012 год. Введите часть строки 20, которую вы хотите применить к расчетному налогу на 2012 год.

, строка 22 — возврат

Если вы хотите запросить возврат средств напрямую на ваш банковский счет, заполните строку 23. В выписке по счету будет указано, когда средства были зачислены на ваш счет. В противном случае пропустите строку 23, и ваш возврат будет отправлен вам по почте.

Строка 23 — Прямой перевод средств

Если вы хотите, чтобы деньги зачислялись непосредственно на ваш текущий или сберегательный счет, введите номер маршрута и номера счета. Вы должны использовать счет, не связанный с иностранными банками.

Маршрутный номер должен состоять из девяти цифр. Номер счета может содержать до 17 цифр (как цифр, так и букв). Введите номер без дефисов, пробелов и символов.

Если маршрут или номер счета неверны или не принимаются вашим финансовым учреждением, ваш возврат будет отправлен вам в виде бумажного чека.

Заполняя строку 23, вы разрешаете отделу и своему финансовому учреждению инициировать электронные кредитовые записи и, при необходимости, дебетовые записи и корректировки для любых кредитов, сделанных по ошибке.

Подпись

Декларация должна быть подписана главным должностным лицом корпорации.

Если вы заплатили кому-то за подготовку декларации, составитель также должен подписать. Также должны быть указаны идентификационный номер и номер телефона составителя.

Вы можете поставить отметку в поле для подписи, чтобы дать нам разрешение обсудить ваш возврат с оплачиваемым составителем. Это разрешение остается в силе до тех пор, пока вы не уведомите отдел в письменной форме (по почте или факсу) о том, что разрешение отозвано.

Установка флажка не дает вашему подготовителю полномочий подписывать какие-либо налоговые документы от вашего имени или представлять вас на любой конференции по аудиту или апелляциям. Для таких органов власти вы должны подать в департамент доверенность или форму REV184.

Адрес электронной почты

Если у отдела есть вопросы относительно вашего возврата, и вы хотите получать корреспонденцию в электронном виде, укажите адрес электронной почты под вашей подписью. Установите флажок, чтобы указать, принадлежит ли адрес электронной почты сотруднику корпорации S, оплачиваемому составителю или другому контактному лицу.

Предоставляя адрес электронной почты, вы разрешаете отделу вести переписку с вами или указанным лицом через Интернет, и вы понимаете, что закрытые налоговые данные организации могут передаваться через Интернет.

Вы также принимаете на себя риск того, что к данным может получить доступ кто-либо, кроме предполагаемого получателя. Департамент не несет ответственности за любой ущерб, который организация может понести в результате перехвата.

Это часть серии сообщений об инструкциях M8 корпорации S.

Налоговые декларации о доходах предприятий / Департамент занятости и экономического развития Миннесоты

Компании должны подавать федеральные налоговые декларации и налоговые декларации штата. Мы затрагиваем некоторые важные вопросы для наиболее распространенных бизнес-структур.

ИП

Для целей федерального налогообложения индивидуальный предприниматель сообщает о доходах и расходах от бизнеса в Приложении C или Приложении C-EZ (Форма 1040) и любых связанных формах и графиках.Чистый доход или убыток от бизнеса затем переносятся в индивидуальную форму 1040 собственника. Индивидуальный предприниматель использует Таблицу SE (Форма 1040) для отчета о чистом доходе от самозанятости для целей расчета налога на самозанятость в системе социального обеспечения и Medicare.

В налоговой декларации Миннесоты нет отдельной формы для отчета о доходе от индивидуальной предпринимательской деятельности. Для расчета подоходного налога в Миннесоте владелец использует форму M1, форму декларации о подоходном налоге с физических лиц. К декларации Миннесоты необходимо приложить копию федеральной формы 1040, включая копию Приложения C или Приложения C-EZ и других вспомогательных таблиц.

Партнерство

Для целей федерального налогообложения партнерство подает форму 1065, которая представляет собой информационную декларацию. Партнерство с этой декларацией не уплачивает никаких налогов. Могут потребоваться другие формы и графики, включая таблицы K и K-1. Индивидуальные партнеры используют Таблицу E (Форма 1040), которая подготовлена ​​с использованием информации из их Таблицы K-1 Формы 1065, чтобы указать свою распределяемую долю дохода партнерства, вычетов, кредитов и убытков в индивидуальной Форме 1040. Таблица SE (Форма 1040) ) используется для расчета налога на социальное обеспечение и самозанятость в рамках программы Medicare.

Супружеская пара, которая совместно ведет некорпоративный бизнес и подает совместную федеральную налоговую декларацию, может решить не рассматриваться как партнерство для целей федерального налогообложения при условии, что муж и жена являются единственными членами совместного предприятия и что оба мужа и жена материально участвуют в ведении бизнеса. Получите дополнительную налоговую информацию в IRS в разделе «Семейные пары в бизнесе».

Для целей налогообложения штата партнерство заполняет Форму M3, Партнерскую декларацию и подает ее в Департамент доходов вместе с копией федеральной формы 1065 и Приложений K и K-1.Партнерству также может потребоваться уплатить минимальный сбор, основанный на собственности, заработной плате и продажах, относящихся к Миннесоте. Если у партнерства есть статьи дохода, кредиты или модификации, которые отличаются от его федерального дохода, партнерство также должно выпустить и подать Расписание KPI и / или Расписание KPC. Если у партнерства есть партнеры-нерезиденты, оно может подавать сводный подоходный налог от их имени, используя График KC. Если у него есть индивидуальные партнеры-нерезиденты, которые не будут включены в такой сводный подоходный налог, обычно партнерство обязано удерживать подоходный налог от имени таких партнеров и перечислять его вместе со своей декларацией о партнерстве в Миннесоте, используя График MW-3NR.Индивидуальные партнеры, которые не включены в сводный подоходный налог, также заполняют форму M1, декларацию по индивидуальному подоходному налогу.

C Corporation

Для целей федерального налогообложения корпорация C сообщает о своих доходах, вычетах и ​​кредитах, а также рассчитывает свой налог по форме 1120 или 1120-A. Могут потребоваться вспомогательные формы и графики. Если корпорация выплачивает дивиденды, она должна ежегодно отправлять своим акционерам форму 1099-DIV с указанием суммы выплаченных дивидендов. Копия формы 1099-DIV также подается в налоговую службу.Акционеры сообщают о дивидендах, полученных от корпорации, в индивидуальной форме 1040.

Корпорация C определяет размер своего государственного налога по форме M4 «Корпоративная налоговая декларация по франшизе». Корпорации также, возможно, придется заплатить минимальный сбор, основанный на собственности, заработной плате и продажах, относящихся к Миннесоте.

S Corporation

Для целей федерального налогообложения корпорация S, как правило, не облагается отдельным налогом. Корпорация S хранит форму 1120S и вспомогательные формы и расписания, включая таблицы K и K-1 (форма 1120S).Отдельные акционеры сообщают о своей доле в доходах, вычетах и ​​кредитах корпорации S в своей индивидуальной форме 1040, используя информацию, содержащуюся в Приложении K-1.

Корпорации

S подают в штат Миннесотскую форму M8 Corporation Return вместе с копиями федеральной формы 1120S, а также подтверждающими формами и графиками. Кроме того, корпорации S, возможно, придется заплатить минимальный сбор, основанный на собственности, заработной плате и продажах, относящихся к Миннесоте. Если у корпорации S есть статьи доходов, кредитов или модификаций, которые отличаются от федеральной декларации, она также должна выпустить и подать Schedule KS.Если у корпорации S есть индивидуальные акционеры-нерезиденты, она может подавать сводный подоходный налог от их имени, используя Приложение KC. Если у нее есть индивидуальные акционеры-нерезиденты, которые не будут включены в такой список, обычно корпорация S должна удерживать подоходный налог от имени таких акционеров и перечислять его вместе с декларацией корпорации S Миннесоты, используя график MW-3NR. Акционеры-физические лица, не включенные в Приложение KC, также должны заполнить форму M1, индивидуальную налоговую декларацию.

Общество с Ограниченной Ответственностью

В соответствии с Положением о казначействе организаторы общества с ограниченной ответственностью могут выбрать, как будет облагаться налогом общество с ограниченной ответственностью. Вообще говоря, LLC с одним участником может облагаться налогом либо как корпорация, либо как индивидуальное предприятие. LLC с двумя или более участниками могут облагаться налогом либо как товарищество, либо как корпорация. Обратите внимание, что для LLC с одним участником это решение также повлияет на то, нужен ли LLC идентификационный номер налогоплательщика. Департамент доходов Миннесоты указал, что компания с ограниченной ответственностью Миннесоты получит налоговый режим для государственных целей, который она получает для федеральных целей.Лицам, рассматривающим возможность создания компании с ограниченной ответственностью, рекомендуется проконсультироваться со специалистом по налогообложению относительно налогового режима такого лица на уровне штата и на федеральном уровне.

Ведение бизнеса не из Миннесоты, штат Миннесота

Предприятия, не принадлежащие к Миннесоте, которые ведут бизнес в Миннесоте или владеют здесь собственностью, могут подлежать налогообложению государством, если они имеют достаточную «связь» или связь с Миннесотой, чтобы оправдать введение налогового законодательства Миннесоты. Действия, которые создают нексус, включают, но не ограничиваются:

  • Офис в Миннесоте
  • Наличие сотрудников или независимых подрядчиков, ведущих бизнес в Миннесоте
  • Владение или аренда недвижимого или движимого имущества в Миннесоте
  • Получение или регулярное ведение бизнеса в Миннесоте.

Получение или привлечение бизнеса в Миннесоте включает в себя такие действия, как продажа продуктов или услуг клиентам в Миннесоте, которые получают продукт или услугу в Миннесоте; участие в сделках с клиентами в Миннесоте, которые связаны с нематериальной собственностью и приводят к получению дохода; сдача в аренду движимого имущества в Миннесоте; и продажа или аренда недвижимости, расположенной в Миннесоте. Методы регулярного ведения бизнеса в Миннесоте включают прямую почтовую рассылку и телефонные разговоры, а также различные формы рекламы, включая печатные издания, радио и телевидение.

Эту проблему сложно решить. Дополнительную информацию о стандартах связи и исключениях, а также о других требованиях для предприятий, не относящихся к Миннесоте, можно получить в Департаменте доходов Миннесоты.

Form BANK Загрузите заполняемый PDF-файл или заполните онлайн-разрешение для прямого дебета Minnesota

Form BANK, Authorization for Direct Debit for

(year)

Заполните, если вы подаете налоговую декларацию в электронном виде (Форма M1, M2, M3, M4, M4NP, M8, M11 или M11L), и вы хотите разрешить перевод средств

со своего счета для уплаты налога, как указано в вашей декларации.Не заполняйте при подаче бумажной декларации.

Ваше имя или имя юридического лица

Номер социального страхования или налоговый идентификационный номер Миннесоты

Имя супруга, если подает совместную регистрацию (или партнера, если подает заявление о партнерстве)

Номер социального страхования супруга (при подаче совместной)

Уличный адрес

Город

Штат

Почтовый индекс

Тип счета

Маршрутный номер

Введите дату, когда вы хотите

снятие суммы

Проверка

со своего счета.

Номер счета

Сумма для снятия

Сбережения

Я разрешаю налоговому департаменту Миннесоты инициировать дебетовые записи на мой счет, как указано выше. Это полномочие будет оставаться в силе до тех пор, пока департамент не получит письменное уведомление

о прекращении его действия по крайней мере за 30 дней до даты вступления в силу.

Ваша подпись

Подпись супруга (при совместной регистрации)

Дата

Телефон в дневное время

ERO: Приложите Миннесотские копии всех форм W-2, W-2G и 1099-R и

любой другой формы, которая показывает Миннесоту подоходный налог удерживается и хранится в ваших записях.

НЕ отправляйте по почте Form BANK в Департамент доходов Миннесоты, если не требуется.

Инструкции БАНКА формы

Если вы являетесь налогоплательщиком

Если вы являетесь БАНКОМ электронной формы

Заполните форму, если вы заполняете форму

в электронном виде

Отправитель возврата (ERO)

Вариант прямого платежа является добровольным и

применяется только к электронному возврату

M1, M2, M3, M4, M4NP, M8, M11

В настоящее время IRS требует, чтобы вы сохраняли регистрацию

.

Forms W ‑ 2, W ‑ 2G и 1099, а также другие

или M11L, и вы хотите иметь

документов в течение трех лет. Вы также должны

Подписывая форму BANK, вы разрешаете —

ваши налоги, подлежащие автоматическому уплате —

, сохраните с этими записями IRS подписанный,

в Департаменте доходов Миннесоты

, выписанный (прямой платеж) с вашего

оригинал формы БАНК, Миннесота копии

для автоматического списания налогов, причитающихся

, всех форм W ‑ 2, W ‑ 2G и 1099, и любых

непосредственно с вашего текущего или сберегательного счета

или сберегательного счета.

другая форма, которая показывает доход Миннесоты

счет

.

Удерживается налог.

Банковское разрешение на прямой

Вы должны подписать и поставить дату на этой форме. Если вы

Если вы решите отказаться от записей Миннесоты

, подающих совместную декларацию, ваш супруг (-а) также должен соответствовать

Дебет (БАНК) текущему

ранее, минимальный срок, в течение которого вы подписываете

.

правила аренды ACH.

должен хранить эти документы в файле до

Ваш налоговый составитель должен хранить

на конец календарного года, в котором подписанная форма

БАНК до конца декларации

была подана в электронном виде.

календарный год, в котором ваша декларация составляла

Если мы запросим копии Forms BANK, W ‑ 2,

, поданные в электронном виде.

W ‑ 2G или 1099, вы должны предоставить информацию.

Если вы готовите свой собственный возврат, храните

mation в течение пяти рабочих дней.

Форма БАНК с вашей налоговой отчетностью.

Не отправляйте форму БАНК по почте, если мы не попросим.

Не отправляйте эту форму по почте в отдел.

вам это сделать.

Руководящий документ: основные файлы (MF) — процедуры и административные требования

PDF-версия (415 КБ, 40 страниц)

Дата пересмотра: 01.01.2019
Дата вступления в силу: 2019/02/13

Версия
Руководящий документ: основные файлы (MF) — процедуры и административные требования
2 января 2019 г.,
Заменяет
Руководящий документ — Основные файлы (MF) — Процедуры и административные требования
1 мая 2017 г.
Изменить
1) 1 мая 2017 г.
Некоторые исправления по всему документу
Характер и / или причина изменения
Пересмотренное руководство носит административный характер и было разработано для облегчения инициатив по обмену информацией, которые осуществляются в сотрудничестве с Международной программой регуляторов генерических лекарственных средств (IGDRP).Эти инициативы включают повышение эффективности практики MF. В документе также представлены изменения в процессе, которые менее обременительны для промышленности и Министерства здравоохранения Канады.
Изменение
2) 2 января 2019 г.
Некоторые исправления по всему документу
Характер и / или причина изменения
Пересмотренный руководящий документ носит административный характер и был пересмотрен с целью повышения ясности в отношении требований к регистрации транзакций с мастер-файлами.

Предисловие

Руководящие документы предназначены для оказания помощи профессионалам отрасли и здравоохранения в том, как соблюдать регулирующие законы и правила. Руководящие документы также помогают персоналу понять, как задачи и задачи Министерства здравоохранения Канады должны выполняться справедливым, последовательным и эффективным образом.

Руководящие документы — это административные инструменты, не имеющие силы закона и, как таковые, допускают гибкость в подходе.Альтернативные подходы к принципам и методам, описанным в этом документе, могут быть приемлемыми при условии, что они поддерживаются адекватным обоснованием. Альтернативные подходы следует обсудить заранее с соответствующей программной областью, чтобы избежать возможного вывода о несоблюдении применимых законодательных или нормативных требований.

Как следствие вышесказанного, не менее важно отметить, что Министерство здравоохранения Канады оставляет за собой право запрашивать информацию или материалы или определять условия, не описанные конкретно в этом документе, чтобы Департамент мог адекватно оценить безопасность, эффективность, или качество терапевтического продукта.Министерство здравоохранения Канады стремится к тому, чтобы такие запросы были обоснованными и решения были четко задокументированы.

Этот документ следует читать вместе с сопроводительным уведомлением и соответствующими разделами других применимых руководящих документов.

Содержание

1. Введение

Главный файл (MF) — это справочник, который предоставляет информацию о конкретных процессах или компонентах, используемых при производстве, переработке или упаковке лекарства.MF — полезный инструмент для предоставления информации Министерству здравоохранения Канады, где эта информация является конфиденциальной деловой информацией (CBI) и недоступна производителю лекарственной формы или спонсорам заявки на лекарство, DIN (идентификационный номер лекарственного средства). или заявка на клиническое исследование (CTA) (далее именуемые Заявители). Министерство здравоохранения Канады обязано защищать конфиденциальную деловую информацию в соответствии с законом.

Этот руководящий документ содержит определения, связанные с MF, информацию о требованиях к подаче документов, процедурах обработки и оценки для MF типа I — IV, а также излагает требования к регистрации для новых MF, а также других транзакций MF, включая административные изменения, обновления, отзыв и закрытие.

1.1 Цель политики

Для предоставления указаний по процедурам, которые позволяют держателям MF или уполномоченным агентам MF подавать CBI напрямую в Министерство здравоохранения Канады, чтобы на них можно было ссылаться в поддержку подачи заявки на лекарство (включая заявки DIN) или CTA в отношении информации о качестве.

1.2 Заявления о политике

Для целей данного руководства и в соответствии с Руководящим документом: Подготовка деятельности по регулированию лекарственных средств в формате электронного общего технического документа (eCTD) MF классифицируются как регулирующие операции (см. Раздел 1.4 для определения).

Мастер-файлы — это добровольные регистрации, поданные в Министерство здравоохранения Канады, на которые могут ссылаться заявители, обращающиеся за разрешениями на маркетинг лекарственных средств или разрешениями на клинические испытания с использованием фармацевтических и биологических препаратов.

Кандидаты несут ответственность за предоставление неконфиденциальной деловой информации, предоставленной Держателем МФ или уполномоченным Агентом МФ, полученной в открытом доступе и / или разработанной Заявителем в заявке на лекарственное средство, заявке DIN или CTA.

Кандидат должен убедиться, что информация, включенная в MF, является актуальной и что MF был получен Министерством здравоохранения Канады, связавшись с Держателем MF или уполномоченным агентом MF для подтверждения перед подачей их заявки, заявки DIN или CTA в Health. Канада.

Ограниченная часть MF будет храниться в строгой конфиденциальности и будет использоваться для поддержки подачи лекарств или CTA только после получения письменного письма-разрешения (LoA) от Держателя MF или уполномоченного агента MF.

LoA подписывается держателем MF или уполномоченным агентом MF и указывает Министерству здравоохранения Канады, что заявитель и держатель MF договорились о том, что MF может быть передан во время оценки подачи заявки на лекарство или CTA.

1.3 Область применения и применение

Этот руководящий документ применяется ко всем держателям MF, уполномоченным агентам MF или кандидатам, использующим MF для поддержки подачи заявок на лекарственные препараты и заявок DIN для использования людьми или CTA; и сотрудники Министерства здравоохранения Канады, участвующие в процессах MF.Подача и заявки включают в себя: Заявление о новом лекарстве для чрезвычайного использования (EUNDS), Заявление о новом лекарстве (NDS), Сокращенное представление о новом лекарстве (ANDS), сокращенное EUNDS (AEUNDS), Дополнения, Заявки на DIN (DINA и DINB), Post-DIN Изменения для фармацевтических препаратов (PDC), Уведомляемые изменения (NC) (в случае биопрепаратов), Пост-авторизационные изменения Отдела 1 для биопрепаратов (PDC-B), Годовые отчеты о биологических продуктах (YBPR), CTA, CTA-Notifications (CTA- N) и CTA-Amendments (CTA-A). На MF могут ссылаться более чем один заявитель.

Руководство также применимо к держателям MF или уполномоченным агентам MF, намеревающимся подать документы MF, на которые имеются перекрестные ссылки в заявках на лекарственные препараты и заявки DIN для использования людьми и ветеринарами или CTA. Для получения информации о требованиях к МФ, относящимся к ветеринарным лекарственным препаратам и субстанциям, обратитесь к Руководству по отраслевой подготовке подачи новых ветеринарных лекарств.

Руководящий документ не применяется к MFs, используемым для поддержки натуральных продуктов для здоровья (NHPs), подпадающих под действие Положений о натуральных продуктах для здоровья.Для NHP MF обратитесь к форме заявки на лицензию на продукт или свяжитесь с Управлением натуральных и безрецептурных продуктов для здоровья (NNHPD).

МЖ классифицируются по следующим типам:

Таблица 1: Классификация мастер-файлов
Тип I
Мастер-файлы активного вещества (ASMF)
Тип II
Мастер-файлы системы закрытия контейнера (CCS MF)
Тип III
Мастер-файлы наполнителя (MF наполнителя)
Тип IV
Основные файлы лекарственных форм

Для фармацевтики:
Активные фармацевтические ингредиенты (API) (лекарственные вещества), исходные материалы или промежуточные продукты, используемые при производстве лекарственного вещества.

Для биопрепаратов:
Лекарственные вещества могут включать нерасфасованные промежуточные продукты, вакцинные антигены, адъюванты (за исключением квасцов), альбумин (за исключением случаев, когда они используются в качестве наполнителя), важнейшее сырье для радиофармацевтических препаратов или векторы для генной терапии.

Системы закрытия контейнеров (CCS) или компоненты CCS. Все вспомогательные вещества, включая вспомогательные вещества биологического происхождения (например, альбумин), оболочки капсул, ингредиенты покрытия, красители, ароматизаторы и другие добавки (например,g., желатин, квасцы и питательная среда). Лекарственные формы и полупродукты.

1.4 Определения

Сноска 1
Активный фармацевтический ингредиент (API)
См. Определение лекарственного вещества.
Заявитель
Компания, подающая заявку на лекарство, заявку DIN или CTA. Это может быть или не быть производителем лекарственной формы (также именуемым Спонсором).
Часть заявителя
Неконфиденциальная бизнес-информация, содержащаяся в MF, ранее называвшаяся Открытой частью (см. Раздел 2.1).
Уполномоченный агент MF
Любое лицо, назначенное Держателем MF для подачи заявления на MF или выступать от имени Держателя MF.
КРС / трансмиссивная губчатая энцефалопатия (BSE / TSE) Декларация:

Подтверждение / аттестация того, что материалы, используемые при производстве продукта, подвержены загрязнению агентами, которые могут передавать бычий / трансмиссивную губчатую энцефалопатию (BSE / TSE), и что риск передачи агентов губчатой ​​энцефалопатии животных был сведен к минимуму .

См. Бланк заявки на получение лекарств для человека и ветеринарных препаратов и заявок на клинические испытания (CTA) мастер-файла (MF).

Конфиденциальная деловая информация (CBI)
в отношении лица, к бизнесу или делам которого относится данная информация, означает — в соответствии с нормативными актами — деловую информацию
(а), который не является общедоступным;
(b) в отношении которого лицо приняло разумные в данных обстоятельствах меры для обеспечения того, чтобы он оставался недоступным для общественности; а также
(c), который имеет фактическую или потенциальную экономическую ценность для человека или его конкурентов, поскольку он не является общедоступным, и его раскрытие приведет к материальным финансовым потерям для человека или материальной финансовой выгоде для их конкурентов [Закон о пищевых продуктах и ​​лекарствах] .
Сопроводительное письмо
Письмо, сопровождающее транзакцию MF, в котором объясняется цель и содержание пакета, предоставленного Министерству здравоохранения Канады.
Лекарственная форма
Тип фармацевтического продукта (например, таблетка, капсула, раствор, крем), который обычно, но не обязательно, содержит лекарственное вещество в сочетании с вспомогательными веществами.
Производитель лекарственной формы
Компания-производитель готовой лекарственной формы.
Лекарственный препарат
Лекарственная форма в окончательной упаковке, предназначенная для продажи.
Лекарственное вещество (активный фармацевтический ингредиент)
Любое вещество или смесь веществ, предназначенная для использования в производстве лекарственного препарата и которая при использовании в производстве лекарственного средства становится активным ингредиентом лекарственного продукта.
Письмо о доступе (LoA)
Письмо, написанное и подписанное Держателем МФ или Уполномоченным агентом МФ, указывающее Министерству здравоохранения Канады, что заявитель и Держатель МФ договорились о том, что в МФ можно обращаться во время оценки подачи заявки на лекарство или CTA.
Производитель
Компания, производящая продукцию, на которую распространяется действие MF. Это может быть производитель лекарственного вещества, системы укупорки контейнеров (CCS) или компонента CCS, наполнителя или готовой лекарственной формы.
Держатель MF
Компания, представившая MF. Это может быть производитель продукта, описанного в MF, и / или создатель CBI.
MF Обновление
Обновление — это пересмотр или изменение любой информации, представленной в существующем MF, и / или замена существующего MF.
Регулирующая деятельность
Сборник всех регулирующих транзакций на протяжении всего процесса определенного действия, который включает, помимо прочего, NDS, ANDS, приложение DIN, CTA и YBPR.
Нормативная транзакция (последовательность)
Любой информационный пакет, отправленный заявителем в рамках регулирующей деятельности, такой как исходные данные, незапрашиваемая и запрошенная информация.
Запрещенная часть
CBI, содержащийся в MF, ранее называвшийся Закрытой частью (см. Раздел 2.1).
Заявление об обязательствах
Заявление Держателя МФ или уполномоченного Агента МФ о том, что информация, предоставленная в МФ, является достоверной и точной.

1,5 Фон

Принципы, изложенные в этом руководящем документе, предназначены для обеспечения большей согласованности с процедурами, используемыми на международном уровне для управления МФ. Обширные знания были получены благодаря международным регуляторным инициативам, таким как Международная программа регуляторов дженериков (IGDRP), которая была создана для содействия сотрудничеству и сближению в программах регулирования непатентованных лекарств.Этот руководящий документ также включает процедуры и терминологию, возникшие в результате принятия руководящих принципов Международного совета по гармонизации (ICH) и использования сертификатов соответствия монографиям Европейской фармакопеи (CEP). В целях данного документа и в соответствии с передовой международной практикой используется термин Мастер-файл (MF) (ранее известный как Мастер-файл лекарств (DMF)).

2. Руководство по внедрению

2.1 Основные файлы Министерства здравоохранения Канады

MF представляется Держателем MF или уполномоченным агентом MF только в тех случаях, когда компания не желает раскрывать CBI заявителю о подаче лекарственного препарата, заявке DIN или CTA.

MF типа I и типа IV делятся на две части: «Часть заявителя» и «Часть с ограничениями». Часть с ограниченным доступом содержит информацию, которую Держатель MF считает конфиденциальной и которая направляется Держателем MF или уполномоченным агентом MF непосредственно в Министерство здравоохранения Канады. Часть Заявителя содержит информацию, которую Держатель МФ считает неконфиденциальной. Он предоставляется заявителю и обычно включается как часть заявки заявителя на лекарственное средство, заявки DIN или CTA с прилагаемым LoA.LoA подписывается Держателем МФ или уполномоченным Агентом МФ и указывает Министерству здравоохранения Канады, что Держатель МФ согласился с тем, что в МФ можно обращаться во время оценки заявки на лекарственное средство или CTA Заявителя.

2.1.1 Конфиденциальность

В рамках Health Canada ограниченная часть MF является конфиденциальной, и должностные лица Health Canada должны защищать информацию в соответствии с действующим законодательством, включая Закон о доступе к информации и Закон о пищевых продуктах и ​​лекарствах.

Закон о доступе к информации применяется, когда в соответствии с этим Законом делается запрос на доступ к записям, находящимся под контролем государственного учреждения. Раздел 20 Закона представляет собой обязательное исключение, которое защищает информацию третьих лиц, например коммерческую тайну; конфиденциальная финансовая, коммерческая, научная или техническая информация; информация, раскрытие которой может привести к финансовым потерям или выгоде либо нанести ущерб конкурентной позиции третьей стороны; или это может помешать договорным или другим переговорам.

Конфиденциальная деловая информация, содержащаяся в МФ, также может подлежать раскрытию властями Закона о пищевых продуктах и ​​лекарствах. Раздел 21.1 (2) разрешает раскрытие CBI о терапевтическом продукте, если министр считает, что продукт может представлять серьезный риск причинения вреда здоровью человека. Раздел 21.1 (3) Закона о пищевых продуктах и ​​лекарствах разрешает раскрытие CBI о терапевтическом продукте правительству, лицу, у которого министр обращается за советом, или соответствующим лицам с целью защиты или укрепления здоровья человека или безопасности общественные.См. Проект руководящего документа Министерства здравоохранения Канады — Раскрытие конфиденциальной деловой информации в соответствии с параграфом 21.1 (3) (c) Закона о пищевых продуктах и ​​лекарствах.

2.1.2 Требования к регистрации

Рекомендуется, чтобы МП подавались не более чем за один год, но не менее чем за 2 месяца до подачи заявки на лекарственное средство, заявки DIN или CTA со ссылкой на эти МП. Ожидается, что все МФ будут включать как минимум один LoA на момент подачи заявки.

Для новых регистраций в МФ должны быть включены следующие электронные документы Сноска 2 :

  • Одно подписанное сопроводительное письмо с указанием имени MF
  • Письмо-разрешение агента MF от держателя MF, если применимо (см. Раздел 2.1.9 и приложение 3)
  • Форма заявки MF
  • Форма сбора за подачу заявления в MF и соответствующие сборы
  • CEP и Аттестации (только для MF типа I), если применимо (см. Приложение 4), и
  • LoA (см. Раздел 2.1.7 и приложение 2)

MF типа I и типа IV должны включать следующее:

  • Заявитель и детали с ограничениями
  • Копия общего обзора качества (QOS) в формате Microsoft Word
  • Сертифицированный информационный документ о продукте (CPID) в формате Microsoft Word.Шаблон CPID можно адаптировать для предоставления только тех разделов, которые относятся к производству и контролю лекарственного вещества.

Для MF типа II и типа III несколько компонентов могут быть включены в одну MF при условии, что компоненты аналогичны (например, полная система укупорки контейнера, разные составы пробок, несколько ароматов). Для каждого MF будет применяться ограничение в 50 компонентов. Пронумерованный указатель, в котором перечислены все компоненты, должен быть включен в MF в модуле 1, раздел 1.0.7 Примечание для рецензента. Дополнительные компоненты следует подавать в новый MF.

MF, поданная в поддержку CTA, может включать QOS вместо части заявителя и части с ограничениями. Кроме того, в подтверждение CTA может быть подана единая MF, охватывающая как активное вещество (MF типа I), так и лекарственную форму (MF типа IV).

Следует отметить, что MF будут рассматриваться только в связи с подачей заявки на лекарство от заявителя, заявкой DIN или CTA, для которых был предоставлен LoA. Министерство здравоохранения Канады не разрешает МФ, кроме как в сочетании с DIN, Уведомлением о соответствии (NOC) или Письмом об отсутствии возражений (NOL), выпущенным для соответствующего лекарственного препарата.Таким образом, Health Canada не имеет общедоступной базы данных, в которой перечислены все МФ, зарегистрированные в Канаде.

2.1.3 Именование главного файла

Для MF типа I предпочтительным названием MF должно быть общее название (например, Международное непатентованное название (INN) для активного фармацевтического ингредиента), за которым следуют внутренние торговые марки API любого производителя, процессы или коды для идентификации конкретный продукт. Если возможно, любые противоионы или сольватированные состояния API должны быть четко идентифицированы.

Один MF может содержать информацию о различных продуктах или семействе продуктов. MF типа I могут содержать информацию о различных продуктах в соответствии с разделом 2.1.10 Когда подавать регистрацию нового MF. MF типа II и типа III могут содержать информацию о различных продуктах в пределах семейства продуктов (например, для пробок, изготовленных с использованием одного и того же состава). MF типа IV могут иметь более одной концентрации продукта с одним и тем же составом, за исключением изменений, необходимых для согласования с разной концентрацией.Однако в таких случаях информация для каждого продукта должна быть четко дифференцирована в пределах MF типа IV.

Если у держателя MF есть более одного MF для аналогичного продукта, в сопроводительном письме следует указать это прямо и предоставить информацию, позволяющую различать разные продукты. Информация, позволяющая различать разные продукты, должна быть представлена ​​в сравнительной таблице. Держатель MF должен предоставить имя, которое отличает MF от любых ранее зарегистрированных MF.

2.1.4 Формат и структура мастер-файла

С 1 января 2016 г. Министерство здравоохранения Канады больше не принимает бумажные копии MF. МФ должны соблюдать требования к подаче и форматированию, изложенные в Руководстве по подготовке нормативной документации по лекарственным средствам в формате «только в электронном виде, не относящемся к eCTD», который включает руководство по структуре и содержанию МФ, а также разбивку частей заявителя и ограниченного доступа в МФ. . Также см. Уведомление 2015 г. — Re: Подготовка мастер-файла лекарственного средства (DMF) в формате «Non-eCTD Electronic-Only» для получения дополнительной информации об электронной подаче MF.

Держатели

MF или уполномоченные агенты MF также могут подавать свои MF в формате eCTD и должны обращаться к Руководству: Подготовка мероприятий по регулированию лекарственных средств в формате электронного общего технического документа. Перед подачей eCTD MF, держатели MF или уполномоченные агенты MF должны связаться с Министерством здравоохранения Канады по электронной почте [email protected]

Все документы должны быть представлены в формате Portable Document Format (PDF) или в формате Microsoft Word. Документы также могут быть предоставлены в формате Microsoft Excel, если это применимо.

По состоянию на март 2016 г. все бумажные МФ, ранее зарегистрированные в Министерстве здравоохранения Канады, должны были быть преобразованы в электронный формат без eCTD или eCTD. Любые MF, которые не были преобразованы в электронный формат, отличный от eCTD или eCTD, считаются приостановленными (дальнейший доступ к MF для оценки не предоставляется, и никакие обновления не принимаются). Если Держатель МФ желает повторно активировать приостановленный или закрытый МФ в будущем, необходимо отправить сопроводительное письмо в Министерство здравоохранения Канады с преобразованным МФ в электронном формате (включая любые актуальные обновления с даты приостановления или закрытия).Тот же номер MF будет сохранен, и будет взиматься плата за регистрацию нового MF.

Держатели

MF или уполномоченные агенты MF также могут преобразовать свои MF из формата без eCTD в формат eCTD. В качестве базового требования при преобразовании MF из формата, отличного от eCTD, в формат eCTD держатель MF или уполномоченный агент MF должен включить весь MF в свою первую транзакцию eCTD. Недостаточно преобразовать MF в формат eCTD, просто отправив следующую транзакцию в eCTD через Common Electronic Submission Gateway (CESG) (т.e., отправка LOA или обновления в формате eCTD в качестве последующей транзакции для MF, в настоящее время не в формате eCTD).

Обратите внимание: после того, как MF был подан или преобразован в формат eCTD, все последующие транзакции также должны быть зарегистрированы в формате eCTD через CESG. Любые последующие транзакции, поданные в формате, отличном от eCTD, для MF, уже поданных в формате eCTD, будут отклонены и уничтожены или возвращены отправителю за его счет.

2.1.5 Официальный язык переписки

MF может быть подана на любом из официальных языков Канады (английском или французском).

2.1.6 Куда отправлять регистрацию мастер-файла

транзакции MF в формате, отличном от eCTD, должны быть отправлены в административный блок MF:

Блок администрирования главного файла
Управление ресурсов и операций
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Финансовый корпус, 2 этаж
Локатор адресов: 0201A
Набережная 101, Пастбище Танни,
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Электронная почта: [email protected]
Факс: 613-941-0825

Транзакции

MF в формате eCTD должны быть отправлены через CESG.

Заполненная и подписанная форма заявки на участие в MF должна сопровождать MF.

2.1.6.1 Информация о доставке / таможне
Держатели

MF или уполномоченные агенты MF несут ответственность за все расходы, связанные с отправкой документов и электронной информации в Health Canada, включая любые применимые таможенные и / или брокерские сборы.Пакеты должны указывать «Условия DDP (Доставлено с оплатой пошлины)». Любые посылки, отправленные в Health Canada с запросом дополнительных расходов от грузоотправителя или брокерской фирмы, будут возвращены отправителю за их счет.

2.1.7 Письма доступа (LoA)
Держатели

MF или уполномоченные агенты MF подают CBI напрямую в Министерство здравоохранения Канады. На эту информацию можно ссылаться для поддержки подачи заявки на лекарство, заявки DIN или CTA в отношении информации о качестве. CBI будет использоваться только для целей оценки подачи заявки на лекарство, заявки DIN или CTA, если Держатель MF или уполномоченный агент MF предоставит LoA на официальном бланке компании, подписанный Держателем MF или Уполномоченным агентом MF (см. Приложение 2 ).Все LoA остаются в силе на протяжении всего жизненного цикла MF.

2.1.7.1 Информация для включения в письмо о доступе

В LoA должна быть включена следующая информация:

  • Номер MF, если он присвоен Министерством здравоохранения Канады, если еще не назначен статус «будет назначен»
  • Название MF и
  • Имя и адрес заявителя, которому предоставлен доступ к MF

В LoA НЕ следует включать следующую информацию:

  • Название продукта или строка
  • Тип заявки или номер

Образец письма-доступа см. В Приложении 2.

2.1.7.2 Подача письма о доступе

Отдельный LoA требуется для каждого кандидата, который ссылается на МФ в своей заявке на лекарство, заявке DIN или CTA. Каждый LoA должен сопровождаться формой заявки на участие в MF, формой заявки на регистрацию MF и подлежит уплате применимых сборов. LoA должен быть датирован и подписан Держателем МФ или Уполномоченным агентом МФ. LoA следует отправить в административный отдел MF в формате eCTD или без eCTD, а также заявителю до подачи заявки на лекарство, заявки DIN или CTA.LoA, предоставленные заявителю, должны быть идентичны LoA, предоставленным административному подразделению MF. Любые расхождения между LoA, предоставленными заявителю, и LoA, предоставленными административному отделу MF, могут привести к задержкам в оценке подачи лекарственного препарата, заявки DIN или CTA.

Для MF типов I и IV LoA предоставляет доступ к MF полностью. LoA действительно для всех продуктов и материалов от Заявителя, ссылающегося на МФ. Следовательно, на каждого заявителя требуется только один LoA на время существования MF.

Для MF типов II и III LoA может предоставлять доступ к определенным компонентам в пределах MF или MF целиком. При предоставлении доступа к нескольким компонентам в пределах MF или MF в целом, требуется только один LoA для каждого кандидата на время существования MF. При предоставлении доступа к дополнительному компоненту, не включенному в первый LoA, требуется новый LoA с соответствующей платой.

MF могут также ссылаться на другие MF и на них могут ссылаться другие MF. В таких случаях держатели MF или уполномоченные агенты MF должны подать LoA, предоставляя другому держателю MF доступ к их MF.Например, когда MF типа IV ссылается на MF типа I, держатель MF типа I или уполномоченный агент MF должен подать LoA, предоставляющий доступ держателю MF типа IV. Также должны быть поданы отдельные LoA, предоставляющие заявителю доступ к MF типа I и к MF типа IV.

Плата за обработку LoA взимается каждый раз при подаче LoA. LoA следует пересматривать и обновлять только при изменении имени Заявителя. В этих случаях с держателей MF взимается соответствующая комиссия. Если Держатель МФ меняет название своей компании, Держатель МФ или Уполномоченный агент МФ может отправить письмо, в котором говорится, что их имя изменилось, но все предыдущие LoA (выпущенные под предыдущим именем Держателя МФ) остаются в силе.Никакие сборы не взимаются за изменение имени Держателя МФ, если не выпущены новые LoA. Пожалуйста, обратитесь к Разделу 2.1.11 для получения дополнительной информации о сборах MF.

Пожалуйста, свяжитесь с административным отделом MF перед повторной подачей LoA для подтверждения требований (см. Раздел 2.1.6).

Примечание. Раздел объявления доступа в CEP не эквивалентен LoA. Кроме того, CEP или копию раздела декларации доступа в CEP не следует отправлять с каждым LoA. См. Раздел 2.1.8 для информации о подаче CEP.

2.1.7.3 Разрешения на доступ к клиническим испытаниям (фармацевтические и биологические препараты)

LoA могут быть поданы для поддержки всех этапов или только определенных этапов CTA. Это остается на усмотрение Держателя MF.

В LoA следует указать спонсора CTA и название клинического исследования. Может быть предоставлена ​​дополнительная информация, такая как информация о больнице, главный исследователь и номер протокола.

LoA следует подавать непосредственно в административный отдел МФ вместе с прилагаемой формой сбора за подачу заявления в МФ и пошлиной.Копия должна быть включена в CTA, CTA-N или CTA-A. Никакая дополнительная копия не должна предоставляться за пределами Приложений.

2.1.8 Сертификаты соответствия монографиям Европейской фармакопеи (CEP)

Во время подачи MF типа I держателям MF или уполномоченным агентам MF рекомендуется включить CEP (если применимо) или подтвердить, что CEP недоступен. Если CEP недоступен во время подачи MF, он должен быть предоставлен, как только CEP станет доступен.В этом случае комиссия не взимается.

Если MF пересматривается / обновляется одновременно с подачей CEP, применяются соответствующие сборы. Пересмотренные CEP будут приниматься с одновременным обновлением MF или без него.

Все CEP должны быть отправлены в административный отдел MF с соответствующими аттестациями, как указано в Приложении 4. При предоставлении пересмотренного CEP должны быть предоставлены новые аттестации. Номер CEP должен быть указан в аттестациях. Пожалуйста, см. Приложение 4 для образца Аттестации CEP.

CEP может быть представлен в качестве вспомогательной информации для MF, если MF не полностью идентичен досье CEP. Рекомендуется предоставить CEP, так как даже если MF отличается от досье, представленного в EDQM (например, заявлен стандарт USP), предоставление CEP может ускорить процесс оценки и избежать отправки ненужных вопросов держателю MF. В этом случае аттестаты могут быть изменены соответствующим образом. Если существуют различия между MF и CEP досье, эти различия должны быть четко заявлены и предоставлена ​​параллельная сравнительная таблица MF и CEP.

Обратите внимание, что CEP также могут быть указаны непосредственно в заявке кандидата на лекарство или в заявке DIN вместо предоставления ASMF. Дополнительную информацию о том, как использовать эту альтернативную процедуру, см. В Руководстве: Использование сертификатов соответствия в качестве вспомогательной информации при подаче лекарственных препаратов.

2.1.9 Назначение уполномоченного главного файлового агента

Когда Агент назначается Держателем МФ (см. Приложение 3), он несет ответственность за всю корреспонденцию, относящуюся к МФ, включая, помимо прочего, следующее:

  • выдача LoA
  • недостатки в обращении
  • обработка платежей
  • обрабатывает связанную корреспонденцию, а
  • регистрация обновлений и административных изменений

Если держатель MF не находится в Северной Америке, рекомендуется, чтобы агент был расположен в Северной Америке для ускорения связи.После назначения уполномоченный агент МФ может выполнять все функции, перечисленные в этом руководящем документе, от имени Держателя МФ.

2.1.10 Когда регистрировать новый мастер-файл

Когда два (или более) MF подаются на аналогичные активные вещества и отличаются только из-за дополнительных этапов обработки или незначительных изменений, перекрестные ссылки на другие связанные MF могут быть включены в сопроводительные письма для ускорения оценки общей информации . Параллельная сравнительная таблица (в Модуле 1, Раздел 1.0.7 Общее примечание для рецензента).

В некоторых случаях требуется регистрация нового MF типа I. В приведенных ниже примерах указаны критерии для новых регистраций MF:

  • другое действующее вещество
  • различных солей активного вещества
  • различный комплекс действующего вещества
  • различных сокристаллов активного вещества
  • различные сольватные или гидратные формы активного вещества
  • другой изомер или смесь изомеров активного вещества
  • рацемат оптически чистого активного вещества
  • оптически чистый энантиомер рацемического активного вещества
  • энантиомер активного вещества
  • введение нового существенно отличного пути синтеза (т.е. что приводит к другой спецификации активного вещества)
  • различных полиморфных форм (приводящих к существенно различным физико-химическим и / или фармакокинетическим свойствам)
  • любое другое изменение активного вещества, которое приводит к существенно другим физико-химическим и / или фармакокинетическим свойствам
  • стерильный сорт нестерильного действующего вещества
  • нестерильный сорт стерильного действующего вещества
  • изменение / добавление сырья различного животного происхождения (только при значительном изменении безопасности действующего вещества)

Следующие ниже примеры не обязательно будут рассматриваться как представляющие новый MF типа I и в большинстве случаев могут быть включены в один MF с тем же номером MF.

  • несколько разные пути синтеза, которые не приводят к существенно разным физико-химическим и / или фармакокинетическим свойствам
  • различных производственных площадок, использующих одинаковые или аналогичные пути синтеза (т. Е. Одинаковые спецификации для активного вещества)
  • различных классов размера частиц (это должно контролироваться в спецификации действующего вещества производителя лекарственного препарата)
  • Другая система укупорки контейнеров, приводящая к другим условиям повторных испытаний и хранения
  • прочие изменения, не приводящие к существенным изменениям физико-химических и / или фармакокинетических свойств

Держатели МФ или уполномоченные агенты МФ должны проконсультироваться с соответствующей областью программы перед подачей МФ, если они не уверены, следует ли подавать отдельную МФ (см. Приложение 1).

2.1.11 Сборы за мастер-файл

Поскольку процесс MF является добровольным и представляет собой исключительно частную выгоду, ненормативные сборы полностью возмещаются в рамках министерского органа по заключению контракта и были разработаны в соответствии с Политикой и руководящими принципами внешних сборов Министерства здравоохранения Канады и соответствующим Казначейством Политика Секретариата Канады (TBS) (например, Политика стандартов обслуживания для внешних сборов).

Сборы взимаются за регистрацию и обработку каждого нового MF, LoA и обновления.Если LoA подано повторно, то пошлина взимается каждый раз при его повторной подаче.

Информацию о сборах за обработку новых MF, LoA и обновлений см. В Форме сбора за подачу заявления в MF.

Тарифы ежегодно повышаются на 2% с первого апреля каждого года. Для получения дополнительной информации о том, как оплачивать сборы для МФ, обратитесь к Руководящему документу: Как оплачивать сборы в Отделение медицинских товаров и продуктов питания (HPFB).

МФ не имеют права на снижение комиссионных сборов.

2.2 Обработка мастер-файлов

При получении пакета регистрации MF выполняются следующие действия:

  • присвоение MF номер и ID досье * MF (только для новых регистраций MF), и
  • , подтверждающий, что правильная информация, документы и формы были поданы в правильном формате (см. Раздел 2.1.4 Формат и структура МФ) и что вся представленная информация, документы и формы заполнены для административных целей (включая те, которые связаны с возмещением затрат)

* Для MF, представленных в eCTD, идентификатор досье присваивается до получения пакета представления.

После завершения административного пакета регистрации MF **:

  • назначается дата подачи (это дата, когда MF считается административно завершенным), а
  • письмо-подтверждение (с номером MF и идентификатором досье) отправляется назначенному контактному лицу MF (Держателю MF или уполномоченному агенту MF), как указано в Форме заявки MF

Если требуемая информация, формы или сборы отсутствуют, неполны или предоставлены в неправильном формате, MF будет помещен на административное удержание, и в этом случае административное подразделение MF направит контактному лицу MF письмо об удержании административного процесса. лицо, запрашивающее недостающую информацию.

** Файл считается завершенным с административной точки зрения, если выполнены все требования к обработке и возмещению затрат. Вся необходимая информация, формы и правильные сборы предоставлены в правильном формате и являются полными.

2.2.1 Административные удержания

На разных этапах административной обработки MF может возникнуть необходимость поместить транзакцию MF в административное удержание, когда пакет MF является неполным (т. Е. Отсутствует необходимая информация, формы или сборы).Это удержание будет оставаться в силе до тех пор, пока требуемая информация не будет представлена ​​в соответствующем формате.

Есть две категории административных арестов:

  1. Удержание процесса
    Подразделение администрирования MF помещает MF в режим ожидания процесса, когда MF считается административно неполным или когда информация подана как неправильный тип транзакции (т. Е. Новый MF должен был быть подан как обновление). Неспособность ответить на запрос дополнительной или исправленной информации в установленное время приведет к тому, что транзакция не будет обработана.Когда причина блокировки процесса устранена, транзакция MF считается завершенной в административном отношении, и к ней будет применена дата подачи заявки.
  2. Удержание возмещения затрат
    В случае, если форма сбора за подачу заявления в MF или применимый сбор не предоставлены или применимый сбор недостаточен, административное подразделение MF запросит форму оплаты и оплату у контактного лица MF. В ожидании получения формы оплаты или платежа транзакция будет помещена на удержание для возмещения затрат.Если бланк комиссии или платеж не будет получен в сроки, указанные в письме, транзакция не будет принята. Неспособность ответить на запрос дополнительной или исправленной информации в установленное время приведет к уничтожению транзакции. Когда причина задержки возмещения затрат устранена, транзакция MF считается завершенной в административном отношении, и к ней будет применена дата подачи.
2.2.2 Требования к обслуживанию приложений и файлов

Вся переписка (эл.g., сопроводительные письма или LoA для МФ) должны исходить от Держателя МФ или уполномоченного Агента МФ, если применимо. Любая информация, представленная третьей стороной, будет отклонена и уничтожена.

Вся информация, содержащаяся в части МФ для заявителя, должна быть предоставлена ​​заявителю в заявке на лекарственное средство, заявке DIN или CTA, ссылающейся на МФ, и должна быть включена в их подачу или заявки в Министерство здравоохранения Канады.

2.2.3 Стандарты производительности основного файла

Вся информация и материалы, поданные с транзакцией MF, будут обработаны административным отделом MF в течение 30 календарных дней после получения полного пакета (т.д., дата, когда МФ считается завершенным в административном порядке).

2.3 Оценка мастер-файлов

MF всегда оцениваются в связи с подачей заявки на лекарство, заявкой DIN или CTA, и, следовательно, решения, принимаемые на основе данных, связанных с качеством, в MF относятся к разрешению на продажу препарата или разрешению на клиническое исследование.

Обратите внимание, что требования Подразделения 2 — Надлежащая производственная практика (GMP) Правил по пищевым продуктам и лекарственным средствам применяются ко всем зданиям, производящим, упаковывая / маркируя, испытывая API и лекарственные формы.За дополнительной информацией обращайтесь к Разделам 1A и 2 Правил и применимым руководствам.

Для получения конкретной информации о технических требованиях к MF следует обращаться к следующим руководящим документам:

Для фармацевтики

Для биопрепаратов

Для получения конкретной информации о содержании МЖ типа II и типа III, не охваченных в приведенных выше руководящих документах, следует обращаться в соответствующую программную область (см. Приложение 1).

2.3.1 Запрошенная информация

Для МЖ типа I вся неконфиденциальная деловая информация о лекарственной субстанции должна быть включена в заявку на лекарство, заявку DIN или CTA.

Вся переписка в отношении Ограниченной части МФ во время оценки подачи заявки на лекарство или CTA будет вестись исключительно между Держателем МФ или уполномоченным агентом МФ и должностными лицами Министерства здравоохранения Канады. Если какие-либо комментарии будут сочтены необходимыми в отношении Ограниченной части МФ, они будут направлены непосредственно Держателю МФ в форме письма о недостатках МФ или запроса разъяснений.Комментарии, относящиеся к части MF Заявителя (например, аналитические методы, данные о стабильности), также могут быть отправлены Держателю MF.

При обнаружении недостатков в Ограниченной части МФ заявитель будет уведомлен о наличии нерешенных вопросов, которые необходимо решить, прежде чем МФ можно будет считать приемлемым для поддержки его заявки на лекарственное средство, заявки DIN или CTA. Другие заявители, ссылающиеся на дефектную МФ (по которым еще не получен ответ на письмо о недостатках МФ или запрос разъяснений), получат такое же уведомление.Держателю МФ или уполномоченному агенту МФ не будет выдаваться новое письмо о недостатке, если только не потребуется направлять новые комментарии (например, другие требования к АФИ, используемому в другой лекарственной форме).

2.3.2 Запросы на разъяснение и письма о недостатках во время оценки MF в поддержку подачи

Во время оценки МФ, если требуется дальнейшее разъяснение информации, Держателю МФ будет направлен запрос на разъяснение в течение 15 календарных дней по электронной почте или факсу.Если Держатель МФ не ответит на запрос о разъяснении в течение указанного периода времени или если МФ имеет значительное количество недостатков, то будет выдано Письмо о недостатках.

Держатель МФ должен будет ответить на Письмо о недостатке в сроки, указанные в Письме. Если требуется дополнительное время, Держатель МФ должен связаться с Заявителем для соответствующей подачи, который свяжется с Директором соответствующего бюро оценки, чтобы запросить продление.

Если ответ на Письмо о недостаточности еще не получен или он не является удовлетворительным на момент принятия решения по заявке на лекарство от заявителя, заявителю будет направлено Уведомление о несоответствии (NON). Никакая дополнительная корреспонденция не будет отправлена ​​Держателю MF, однако ожидается, что он ответит в течение срока, предоставленного Заявителю для ответа на NON.

2.3.2.1 Запросы разъяснений во время оценки мастер-файла в поддержку заявки на клиническое исследование

Если во время оценки МФ в поддержку CTA потребуется дополнительная информация, Держателю МФ или уполномоченному агенту МФ будет направлен запрос на разъяснение в течение 2 календарных дней, и Заявитель будет уведомлен в письменной форме.Кандидат должен обеспечить своевременный ответ Держателя МФ или уполномоченного Агента МФ. Неспособность предоставить удовлетворительный ответ в указанные сроки может привести к отзыву CTA или выдаче Неудовлетворительного уведомления в соответствии с Руководящим документом: Для спонсора клинического исследования: заявки на клиническое исследование).

2.3.3 Ответы на запросы о разъяснении

Для MF, поданных в формате, отличном от eCTD, ответы на запросы разъяснений и письма о недостатках должны быть отправлены в административный отдел MF в формате, отличном от eCTD, в соответствии с Руководством по подготовке нормативной деятельности в отношении лекарственных средств в разделе «Non-eCTD Electronic-Only» «Формат.Любые ответы на запросы разъяснений или ответы на письма о недостатках, полученные в неправильном формате, будут приостановлены административным процессом до тех пор, пока не будет получен ответ в правильном формате, отличном от eCTD. Для MF, поданных в формате eCTD, ответы должны подаваться в виде новой последовательности через CESG.

2.3.4 Отчеты об оценке мастер-файла
Отчеты об оценке

MF будут отправлены вместе с письмами о недостатках. По завершении оценки МФ держатели МФ или уполномоченные агенты МФ могут запросить отчеты в Управлении услуг по планированию, эффективности и анализу.

Управление услуг по планированию, эффективности и анализу (OPPRS)
Управление терапевтических продуктов
Отделение продуктов для здоровья и питания
Локатор адресов: 3002C
Министерство здравоохранения Канады
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Эл. Почта: [email protected]
Телефон: 613-941-1248
Факс: 613-957-1483

2.4 Обновления зарегистрированного основного файла

Обновления должны быть поданы Держателем MF или Уполномоченным агентом MF и должны быть адресованы административному подразделению MF (см. Раздел 2.1.6).

Обновления MF не требуются на временной основе, но требуются, когда изменения соответствуют категориям отчетности, изложенным в Руководящем документе Министерства здравоохранения Канады по изменениям идентификационного номера лекарства (DIN), Пост-уведомление о соответствии (NOC) Изменения — Руководящий документ по качеству или Руководящий документ для спонсоров клинических испытаний: приложения для клинических испытаний. Все обновления подлежат оплате и должны сопровождаться формой сбора за подачу заявления в MF и соответствующими сборами.

Единая электронная копия обновления должна быть отправлена ​​с подписанным и датированным сопроводительным письмом. В сопроводительном письме должно быть четко указано:

  • МФ №
  • ID досье / номер файла HC
  • Тип MF (I, II, III или IV)

Дополнительные административные документы включают:

  • Сводка изменений (параллельное сравнение) затронутых разделов MF с указанием уровня изменения и влияния этого изменения (в Модуле 1, Раздел 1.0.7 Общие примечания для рецензента).
  • Актуальный список всех кандидатов, которым разрешен доступ к MF.
  • Пересмотренная форма заявки MF.
  • MF Заявочный взнос и сборы.

Все затронутые данные должны быть включены в Модуль 3.

При подаче обновленной информации о MF типа II и типа III для дополнительного состава или компонента будет применяться ограничение в 50 компонентов / составов на MF. Дополнительные компоненты или составы следует подавать в новый MF.Держатель MF или уполномоченный агент MF должен включить текущий пронумерованный указатель, в котором перечислены все компоненты / составы в Модуле 1, Раздел 1.0.7 Общие примечания для проверяющего. В пронумерованном указателе должно быть четко указано, какие компоненты / составы добавляются к существующим компонентам / составам.

Только затронутые разделы MF должны быть отправлены с обновлением. Весь MF не должен регистрироваться с обновлением, если он не является преобразованием, как указано в Руководстве по подготовке нормативной деятельности в отношении лекарственных средств в формате «только в электронном формате, не относящемся к eCTD».

Для подачи лекарств и заявок DIN:

Обновления к MF должны быть поданы, когда от заявителя для соответствующей подачи требуется подать Уровень I — Дополнение (т. Е. Существенное изменение качества) или Уровень II — Уведомляемое изменение (в случае биопрепаратов). Во время подачи обновление должно также включать любые изменения, внесенные в промежуточный период, которые рассматриваются как Уровень III — Ежегодные уведомления в Пост-уведомлении о соответствии (NOC) Изменения — Документ с рекомендациями по качеству.Это не освобождает заявителей от необходимости сообщать об изменениях уровня III в их годовом отчете в Министерство здравоохранения Канады, и поэтому держатели МФ или уполномоченные агенты МФ должны своевременно сообщать об этих изменениях каждому кандидату, ссылающемуся на МФ.

Все изменения в MF должны сопровождаться соседней таблицей, в которой перечислены изменения по сравнению с предыдущим MF, и каждое изменение должно быть четко отмечено как изменение, которое подпадает под уровень I, II, III или IV, как описывается в Пост-NOC Changes: Документ с рекомендациями по качеству — Приложения 1-3.

Все изменения Уровня III в MF должны быть зарегистрированы при представлении следующих изменений Уровня I или Уровня II. Нет необходимости сообщать об уровне IV, однако, если изменения уровня IV внесены в документацию, представленную в MF, они должны быть аннотированы для исторических целей. Хотя нет необходимости предоставлять обновление MF только для изменений Уровня III или Уровня IV, Держатели MF или уполномоченные Агенты MF могут подать обновление в любое время. Обратите внимание, что за все обновления, поданные в Health Canada, будет взиматься плата.

Что касается продуктов DIN, обновления к MF должны подаваться, когда ожидается, что соискатель соответствующей заявки представит уведомление, которое требует оценки (изменение после авторизации, раздел 1 (PDC)), как указано в Руководящем документе по пост-авторизации. Изменения в идентификационном номере лекарственного средства (DIN) — Приложение II: Типы документов DIN — Фармацевтические препараты для людей и дезинфицирующие средства. Держатели MF или уполномоченные агенты MF должны предоставить параллельную таблицу, в которой перечислены изменения в MF по сравнению с предыдущим MF, и каждое изменение должно быть четко отмечено.

Кроме того, держатель MF или уполномоченный агент MF должен уведомить каждого кандидата, которому был предоставлен доступ к MF, до внесения изменений, чтобы кандидаты могли обновить свои записи и подать соответствующее заявление или PDC в Министерство здравоохранения Канады, как в соответствии с условиями Руководящего документа по изменениям идентификационного номера лекарственного средства (DIN) или изменениям после уведомления о соответствии (NOC): Документ о качестве. Обновление MF должно быть подано и письмо-подтверждение MF должно быть получено Держателем MF или уполномоченным агентом MF до того, как Министерство здравоохранения Канады получит заявку Заявителя на изменение Post-DIN или представление для изменения Post-NOC (e.g., Дополнение, изменение, подлежащее уведомлению).

Для применения в клинических испытаниях:

Держатели

MF или уполномоченные агенты MF должны обновить MF, если ранее поданная информация устарела. Кроме того, держатель MF или уполномоченный агент MF должен уведомить каждого заявителя клинического исследования, которому был предоставлен доступ к MF, об изменениях, чтобы спонсоры могли обновить свои записи и подать CTA-A или CTA-N в Министерство здравоохранения Канады в качестве в соответствии с Руководящим документом для спонсора клинических испытаний: приложения для клинических испытаний.Обновление MF должно быть подано, и письмо-подтверждение MF должно быть получено Держателем MF или уполномоченным агентом MF до получения Министерством здравоохранения Канады CTA-A или CTA-N заявителями клинических испытаний.

2.4.1 Административные изменения

Административные изменения в MF могут быть поданы в любое время в течение жизненного цикла MF. Плата за подачу административных изменений в МФ не взимается.

2.4.1.1 Передача права собственности и изменение названия компании
Держатели

MF должны уведомить Health Canada в письменной форме, если название компании или право собственности на MF изменились по следующим причинам:

  • выкуп
  • слияние
  • корпоративная реструктуризация
  • изменение названия компании, или
  • передача права собственности

Административные изменения должны подаваться в административный блок MF в формате, отличном от eCTD или eCTD.

Все административные изменения должны подаваться с подписанным и датированным сопроводительным письмом. Сопроводительное письмо должно включать:

  • Номер МФ
  • досье ID
  • MF Тип
  • причина административного изменения (например, передача права собственности, изменение названия компании)
  • список всех затронутых MFs
  • подтверждение того, что все LoA остаются в силе
  • подтверждение того, что все производственные площадки и обработка остаются прежними
  • подтверждение того, что предыдущий уполномоченный агент MF все еще действителен, если применимо

Также необходимы следующие дополнительные документы:

  • пересмотренная форма заявки MF
  • — актуальный список всех кандидатов, которым разрешен доступ к MF, который должен быть предоставлен в Модуле 1, Разделе 1.2.6 Разрешение на обмен информацией для каждого MF

Все передачи права собственности (например, выкуп, слияние) должны подаваться новыми Держателями МФ. В дополнение к требованиям, перечисленным выше, сопроводительные письма должны включать имя и адрес нового Держателя МФ.

Письмо о передаче права собственности от продающегося Владельца МФ на фирменном бланке компании, в котором говорится, что он передает право собственности на МФ приобретающему Владельцу МФ, должно быть представлено в Модуле 1, Разделе 1.2.9 Другая административная информация. Передача права собственности должна включать подтверждение как от текущего, так и от нового Владельца МФ. Любые транзакции по передаче права собственности, полученные Health Canada, которые не сопровождаются письмом о передаче права собственности, будут приостановлены в административном порядке до тех пор, пока письмо не будет предоставлено.

Для любых административных изменений, затрагивающих название компании, в Разделе 1 Модуля 1 также должно быть предоставлено доказательство изменения названия компании (т. Е. Доказательство регистрации или свидетельство о продолжении деятельности).2.9 Другая административная информация.

Когда административное изменение затрагивает несколько MF, транзакция требуется для каждого MF. Например, если изменение названия компании затрагивает 10 MF, Health Canada требует внесения 10 административных изменений (т. Е. По одному на MF).

2.4.1.2 Изменение авторизованного главного файлового агента

Если компания желает сменить текущего уполномоченного агента MF, необходимо направить письмо от Держателя MF в административную единицу MF в надлежащем формате, отличном от eCTD или eCTD.Держатель МФ несет ответственность за то, чтобы у нового назначенного лица была вся необходимая информация (например, исторические записи). Министерство здравоохранения Канады не несет ответственности за предоставление дублирующей информации новому сотруднику.

2.5 Отзыв писем о доступе

Владельцы MF или уполномоченные агенты MF, желающие отозвать разрешение на ссылку на MF для конкретного Заявителя, должны сообщить административному подразделению MF о причинах отказа в доступе в письменной форме (в надлежащем формате, отличном от eCTD или eCTD).Дополнительно должен быть предоставлен список претендентов, у которых еще есть доступ к МФ.

Кандидат, чей LoA отозван из MF, должен быть проинформирован об отзыве LoA Держателем MF или уполномоченным агентом MF. В письме должна быть четко указана дата, после которой материалы больше не будут поставляться Заявителю. Вещества, поставленные до даты отзыва LoA в связи с прекращением действия соглашения о поставке, могут по-прежнему использоваться в разрешенных продуктах в соответствии с условиями разрешения, но MF больше не может упоминаться в последующих заявках.

Health Canada сохранит отозванный LoA в соответствии с надлежащими процедурами, установленными для хранения и удаления записей в соответствии с Законом о библиотеках и архивах Канады. Понятно, что, когда LoA отозван, ранее изготовленное лекарственное вещество / материал больше не будет поставляться Заявителю.

2.6 Закрытие мастер-файла

Держатели MF, желающие закрыть MF, должны уведомить административную единицу MF в письменной форме (в надлежащем формате, отличном от eCTD или eCTD) о причине закрытия, включая заявление о том, что их обязательства были выполнены (т.д., синтез, производственный процесс и контроль качества поддерживаются в актуальном состоянии, и любые изменения, затронувшие заявителей, доводятся до сведения каждого из них и в Министерство здравоохранения Канады). При закрытии держатели МФ или уполномоченные агенты МФ должны предоставить Министерству здравоохранения Канады список всех заявителей, использующих МФ. Понятно, что, когда MF закрыт, продукт, упомянутый в MF, больше не может быть произведен для использования в канадских лекарственных продуктах. Кроме того, на MF больше нельзя ссылаться в последующих заявках на лекарства в Канаде, заявлениях DIN или CTA, если CBI не будет направлен непосредственно заявителю, который включит информацию в свою заявку на лекарство, заявку DIN или CTA.

API, изготовленные и испытанные в соответствии с зарегистрированными процедурами, изготовленные и отправленные производителю лекарственного препарата до закрытия МФ, могут использоваться в продаваемых в Канаде лекарственных препаратах до тех пор, пока запасы не уменьшатся или пока не истечет срок действия API. , что наступит раньше. Полная документация по отгрузке должна вестись в соответствии с канадскими GMP.

Health Canada оценит причины закрытия и при необходимости инициирует послепродажные мероприятия.Если причины закрытия МФ связаны с безопасностью, заявитель должен быть проинформирован о причинах и должен связаться с Министерством здравоохранения Канады по поводу оценки риска для здоровья и любых действий по отзыву. MF будет храниться в Министерстве здравоохранения Канады в соответствии с надлежащими процедурами, установленными для хранения и уничтожения документации в соответствии с Законом о библиотеках и архивах Канады. Министерство здравоохранения Канады может получить доступ к MF после закрытия в соответствии с законом.

Health Canada закроет и заархивирует MF, который не был оценен Health Canada в поддержку подачи заявки на лекарство, заявки DIN или CTA в течение 5 лет после первоначальной регистрации.Если держатель МФ желает повторно активировать МФ в Министерстве здравоохранения Канады, МФ следует подать в формате, отличном от eCTD (через CD или USB-ключ) или в формате eCTD (через CESG). Должно быть предоставлено сопроводительное письмо, в котором говорится о желании Держателя МФ повторно активировать МФ, вместе с обновлениями и применимыми данными с даты закрытия МФ. Тот же номер MF и идентификатор досье будут сохранены, и будут применяться сборы за регистрацию нового MF.

3. Контактная информация

Вопросы или комментарии, относящиеся к этому руководящему документу и процессу MF, следует направлять по адресу:

Блок администрирования главного файла
Управление ресурсов и операций
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Локатор адресов 0201A
Набережная 101, Пастбище Танни,
Оттава, Онтарио,
K1A 0K9
Канада

Электронная почта: [email protected]
Телефон: 613-941-3083
Факс: 613-941-1668

4. Список литературы

4.1 Документы Министерства здравоохранения Канады

Документы

Министерства здравоохранения Канады можно найти на веб-сайте.

Законодательство:

Связанные руководящие документы:

4.2 Международный совет по гармонизации руководящих принципов

4.3 Международное сотрудничество по гармонизации технических требований к регистрации ветеринарных лекарственных препаратов (VICH) Документы

5.Приложения

Приложение 1: Соответствующие адреса

  • Приложение 2: Образец — Письмо о доступе
  • Приложение 3: Образец — авторизация агента
  • Приложение 4: Образец — Аттестационное письмо CEP
  • Приложение 1 — Соответствующие адреса

Лекарственные препараты

Бюро фармацевтических наук (BPS)
Управление терапевтических продуктов
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Локатор адресов: 0201D
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Эл. Почта: [email protected]
Телефон: 613-941-3184
Факс: 613-941-0571

Офис клинических исследований (OCT)

Управление терапевтических товаров
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Локатор адресов: 3105A
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Эл. Почта: [email protected]
Факс: 613-946-7996

Биологические и радиофармацевтические препараты

Управление по нормативным вопросам
Управление биологической и генетической терапии
Министерство здравоохранения Канады
100 Eglantine Driveway,
Локатор адресов: 0601C
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Эл. Почта: [email protected]
Факс: 613-946-9520

Приложение 2: Образец — Письмо о доступе

(дата)

Блок администрирования главного файла
Управление ресурсов и операций
Отделение товаров для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Финансовый корпус, 2 -й этаж Локатор адресов
: 0201A
Прогулочная улица Пастбища Танни, 101
Оттава, Онтарио
К1А 0К9

Уважаемый сэр или госпожа:

Re: Письмо о доступе — (имя основного файла) MF # (YYYY-XXX) (или новый основной файл, если новое представление)

Пожалуйста, примите это письмо как разрешение Министерству здравоохранения Канады на рассмотрение (имя основного файла, MF # YYYY-XXX), на которое ссылается:

Имя заявителя / спонсора
Почтовый адрес,
Штат / провинция, страна
Почтовый индекс

в поддержку своих заявок на лекарственные препараты, заявки DIN или заявки на клинические испытания, поданные в Управление терапевтических продуктов или Управление биологических и генетических терапий Отделения продуктов для здоровья и пищевых продуктов.

С уважением,
(Подпись)

ПРИМЕЧАНИЕ: Пожалуйста, не включайте в свое письмо о доступе какие-либо ссылки на тип / номер заявки или линейки / названия продуктов. Для CTA вы также можете указать имя спонсора CTA, название CTA и номер протокола.

Приложение 3: Образец — Авторизация агента

(дата)

Блок администрирования главного файла
Управление ресурсов и операций
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Финансовый корпус, 2 этаж
Набережная 101, Пастбище Танни,
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Уважаемый сэр или госпожа:

Re: Авторизация главного файлового агента — (Имя главного файла) MF # (YYYY-XXX)

Доводим до вашего сведения, что мы назначили (название компании / название) нашим авторизованным главным файловым агентом для канадского рынка.(Название компании / Имя) будет нести ответственность за:

  1. выдача разрешительных документов;
  2. недостатки в обращении;
  3. обработка уплаты сборов;
  4. обработка связанной корреспонденции; и
  5. регистрации обновлений и административных изменений.

С уважением,
(подпись)

Приложение 4: Образец — Аттестационное письмо CEP

(дата)

Блок администрирования главного файла
Управление ресурсов и операций
Отделение продуктов для здоровья и питания
Министерство здравоохранения Канады
Финансовый корпус, 2 этаж
Набережная 101, Пастбище Танни,
Оттава, Онтарио
K1A 0K9

Уважаемый сэр или госпожа:

Re: Лекарственное вещество — CEP № XXXXXXXXXXXXX

От имени [название производителя API / владельца MF] я подтверждаю следующее:

  1. Я разрешаю Министерству здравоохранения Канады ссылаться на CEP вместе с отчетом A и спецификациями, утвержденными EDQM.
  2. Я подтверждаю, что [название производителя API / владелец MF] предоставит Министерству здравоохранения Канады копию всего досье EDQM и соответствующую корреспонденцию в электронной форме по запросу Министерства здравоохранения Канады.
  3. Я подтверждаю, что GMP для API будет применяться начиная с исходного материала, разрешенного EDQM.
  4. Я подтверждаю, что не было никаких существенных изменений в методе производства и средствах контроля после предоставления CEP или его последней редакции EDQM.
  5. Я подтверждаю, что любые условия / дополнительные тесты, прилагаемые к CEP со стороны EDQM, и любые тесты и ограничения, дополнительные к тем, которые указаны в Ph. Eur. Монография, необходимая для предполагаемого использования вещества, будет прилагаться к каждой партии лекарственного вещества, предназначенного для канадского рынка.
  6. Я подтверждаю, что внутренний метод [вставьте ссылку на собственный метод (ы), не упомянутый в CEP] был представлен в EDQM и используется, как описано в досье, представленном в EDQM.
  7. Я подтверждаю, что API, который будет производиться для канадского рынка, будет производиться способом с использованием производственного процесса, который идентичен маршруту, оцененному EDQM, и что любые производственные тесты или тесты промежуточных продуктов, представленные или запрошенные EDQM будет применяться при производстве API, предназначенного для канадского рынка.
  8. Я подтверждаю, что спецификации, предоставленные заявителю, отражают окончательный набор спецификаций API и внутренние методы, перечисленные в спецификациях, которые были представлены и оценены EDQM.

Подписано [Имя уполномоченного представителя]
[Должность]
[Название производителя API]

Сноски

Сноска 1

Терминология, используемая в этом руководящем документе, такая же, как и в руководствах ICH. Если терминология не определена в этом разделе, читатель отсылается к этим руководящим принципам.

Вернуться к сноске 1 реферер

Сноска 2

MF будут помещены в режим удержания процесса до тех пор, пока MF не будет считаться завершенным.

Вернуться к сноске 2 реферер

Липидомика, управляемая транскриптомикой (TDL), выявляет регулируемые микробиомом мишени липидного метаболизма подвздошной кишки

Доклиническая модельная стратегия для интеграции микробиома и метаболизма липидов

Микробиом и метаболизм липидов — это два сложных и интегрированных компонента, которые требуют упрощения для определения стратегий для потенциальных вмешательство. Поэтому мы воспользовались моделями гнотобиотических животных для контроля факторов окружающей среды, включая состав микробиома (рис.2а, материалы и методы). Мы решили сосредоточиться на влиянии колонизации E. coli . Хотя общепризнано, что E. coli влияет на метаболизм липидов, существует множество штаммов с различными характеристиками, связанными с патогенезом и метаболизмом. В соответствии с нашей целью определения влияния на метаболизм липидов, мы выделили штамм E. coli (M8) из мышиной модели ожирения и метаболического заболевания (Ob / Ob) (ранее использовался в Chakrabarti et al. 27 ). .Таким образом, наши исследования in vivo включали анализ мышей, свободных от микробов (GF), и мышей GF, инокулированных штаммом M8 (называемых мышами M8) (рис. 2b, материалы и методы). Анализ хромосомы M8 и геномов плазмиды (дополнительный S1Data.xlsx) продемонстрировал наличие 25 генов, важных для метаболизма липопротеинов, включая гены синтеза ( lipA ), трафика ( lolA , lolC , lolD , ). lolE и lolB ) и экспорт липопротеинов.

Рис. 2

План и результаты исследования in vivo. a План исследования in vivo эксперимента по моноинокуляции. б E. coli Количество в фекалиях мышей M8 и GF в фекалиях в конце эксперимента. Столбцы указывают на среднее значение, а столбцы ошибок указывают на стандартное отклонение от среднего. c FISH-анализ срезов GF подвздошной кишки. В поперечном сечении GF бактерий не наблюдалось. Пруток = 50 мкм. d FISH-анализ срезов подвздошной кишки мышей М8.Пруток = 50 мкм. E. coli наблюдалась в более глубоких слоях ткани, включая собственную пластинку слизистой оболочки, подслизистые пространства и кишечные крипты. e Сравнение желчных кислот слепой кишки у мышей GF и M8. Столбцы указывают на среднее значение, а столбцы ошибок указывают на стандартное отклонение от среднего. GF без микробов, M8 GF мышей, моноинокулированных штаммом M8 из E. coli , DAPI 4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндол, CY3 цианин 3, bMCAicholic acid β-muricolic acid , TaMCA тауро-α-мюрихолевая кислота, TbMCA тауро-β-мюрихолевая кислота, TCA таурохолевая кислота TCDCA таурохенодезоксихолевая кислота, TUDCA тауроурсодезоксихолевая кислота

Помимо генов, непосредственно нацеленных на метаболизм липидов, изолят M8 также содержал несколько генов, связанных с адгезивным и / или инвазивным фенотипом. 28,29 Они включали генов адгезии tibA и yadA , ранее охарактеризованных у Yersinia, и десять генов пути колановой кислоты, ранее задействованных в адгезии уропатогенной E. coli . 30 Флуоресцентный анализ гибридизации in situ (FISH) продемонстрировал адгезию и инвазию штамма M8 в подвздошную кишку мыши в соответствии с геномным содержанием штамма. Связанные с тканями M8 были обнаружены в просвете, а также в собственной пластинке, подслизистых пространствах и кишечных криптах (рис.2в, г), что указывает на инвазию хозяина штаммом М8. Хотя наблюдаемая колонизация может быть обусловлена ​​условно-патогенезом незрелой GF подвздошной кишки, фенотипическая характеристика модели на мышах способствовала выявлению потенциальных путей, с помощью которых E. coli может регулировать метаболизм липидов и вносить вклад в регуляцию метаболического здоровья.

Еще одним общим свойством штаммов E. coli является их устойчивость к желчным кислотам. 6,31 Анализы in vitro продемонстрировали, что это также относится к штамму M8 (не показан).Поскольку желчь играет важную роль в абсорбции пищевых жиров, мы также исследовали состав желчных кислот у мышей с колонизацией M8 или без нее. Мы наблюдали общую тенденцию к увеличению общего количества желчных кислот (без статистической разницы) при колонизации M8 (рис. 2e). Специально были идентифицированы шесть первичных желчных кислот, включая TCA (таурохолевая кислота), TCDCA (статистически выше для M8), TUDCA, bMCA (статистически выше для M8), TaMCA (более высокие тенденции для M8) и TbMCA (более высокие тенденции для M8) (номенклатуры желчных кислот, приведенных в таблице 1, дополнительные данные S2.xlsx). Уровни TCDCA, цитотоксической желчной кислоты, увеличивались при колонизации M8, в то время как уровни TUDCA существенно не менялись. В изоляте M8 отсутствует аннотированный ген bsh , что соответствует отсутствию вторичных желчных кислот, наблюдаемых в содержимом слепой кишки.

Таблица 1 Используемая номенклатура желчных кислот

В целом обоснование, представленное для доклинической модели, воспроизводило многие аспекты (например, патогенез, желчные кислоты и метаболизм липидов), с помощью которых микробиом (и в частности E.coli ) может регулировать гомеостаз липидов в организме хозяина. Эти свойства, вероятно, влияют на метаболизм липидов хозяина за счет сложной интеграции сигналов и взаимодействий хозяин / комменсал. Затем мы попытались разработать метод стратегического сосредоточения нашего внимания на путях, которые потенциально лежат в основе регуляции метаболизма липидов микробиомом.

Липидомика, управляемая транскриптомикой (TDL)

Текущий липидомический анализ, сфокусированный на устаревших знаниях (верхняя ветвь рис. 1), имеет ограничения, включая изученное пространство липидного метаболизма и / или технические ограничения, и результаты могут быть искажены стабильностью липиды, обработка образцов и пределы обнаружения.Например, в настоящее время идентифицировано около 100 000 видов липидов, и экспериментально поймать все эти виды невозможно. Принимая во внимание признанную роль подвздошной кишки в абсорбции липидов и наблюдаемую ассоциацию штамма M8 с тканью, мы экстрагировали мРНК из мышей GF и M8 для анализа транскриптомики с помощью микроматрицы. Мы сосредоточились на мРНК из-за ее распознавания как эффективного метода характеристики метаболического состояния ткани / клеток-мишеней, позволяющего нам взглянуть на комплексный взгляд на сложности липидного метаболизма и взаимодействий хозяин / микроб.Чтобы повысить уверенность в биологической интерпретации данных липидомики, мы разработали TDL (материалы и методы), в которых используется транскриптомика исследуемой целевой области, а также липидные, биохимические и биохимические базы данных, а также GEM для генерации гипотезы, позволяющей нам выдвинуть гипотезу. спрогнозировать зависящий от состояния список потенциально измененных липидов для дальнейшего измерения и анализа.

Транскриптомика подвздошной кишки

После корректировки множественных сравнений с помощью FDR анализ микроматрицы выявил 696 дифференциально экспрессируемых мРНК (дополнительные S3Data.xlsx) между двумя группами мышей. 400 транскриптов имели более высокий уровень экспрессии в GF по сравнению с 296 более высокими уровнями экспрессии у мышей M8 (рис. 3a). Наиболее сильные активированные транскрипты у мышей M8 включали Saa1 (сывороточный амилоид A1), Retnlb (резистиноподобный бета), Mptx1 (пентраксин 1 слизистой оболочки) и Defb1 (дефенсин бета 1), в то время как самые сильные подавляющие транскрипты M8 включали транскрипты мышей. Defa15 (дефенсин альфа 15), Ces1g (карбоксилэстераза 1G) и Krt12 (кератин 12).В целом данные микроматрицы указывают на изменения в метаболизме липидов, передаче сигналов рецептора, сопряженного с G-белком, передаче сигналов иммунной системы, передаче сигналов цитокинов, передаче сигналов Wnt и трансмембранном транспорте при колонизации M8. В частности, дефицит Ces1g был связан с увеличением веса, инсулинорезистентностью, ожирением печени и гиперлипидемией за счет усиления липогенеза de novo и чрезмерной секреции липопротеинов, богатых триацилглицерином. 32 Что касается измененных уровней желчных кислот, идентифицированных ранее, четыре ключевых гена по-разному экспрессировались у мышей GF и M8 в подвздошной кишке.К ним относятся SLC2A9 , Acox2 , SLC13A2 (все статистически снижено у мышей M8) и SLC2A10 (статистически увеличено у мышей M8). Они потенциально могут повлиять на резорбцию / циркуляцию желчной кислоты в подвздошной кишке (дополнительный S4Data.xlsx). Кроме того, дальнейший анализ КПЦР CYP7A1 (статистически более высокие уровни у мышей M8 с P -значениями 0,0003 с использованием теста Манна Уитни), CYP27A1 , CYP7B1 и CYP8B1 в печени, опосредованное воздействием на b M8 производство кислоты в печени (данные не показаны).

Рис. 3

Входные данные и прогнозы TDL. — график вулкана для значений P и кратных изменений данных транскриптомики подвздошной кишки. Виды мРНК, выделенные зеленым цветом, имеют значения P <0,05 после коррекции FDR и со кратным изменением> 1,5, то есть выше в GF. Красным цветом выделены виды мРНК с P -значениями <0,05 после коррекции FDR и со кратным изменением <-1,5, то есть выше у мышей M8. b Устаревшие знания о воздействии E.coli об изменениях липидного обмена, включая воздействия, опосредованные воспалением, и изменения липидов в пище. c Сопряжение данных дифференциальной экспрессии генов из транскриптомики подвздошной кишки и баз данных на уровне организмов (липидоспецифичных, например, LIPID MAPS, и нелипидоспецифичных, например, Reactome), позволило нам прогнозировать с использованием различных генов потенциальные изменения липидного метаболизма. d Связывая дифференциально экспрессируемые гены в подвздошной кишке с метаболическими моделями в масштабе генома (GEM), мы могли предсказать потенциальные изменения с точки зрения биохимических превращений (реакций) и участвующих метаболитов (включая липиды).Компилируя прогнозы из разных ветвей TDL, мы формулируем прогнозируемое пространство поиска измененных липидов для дальнейшего измерения и анализа. e Сравнение дифференциально экспрессируемых генов, участвующих в различных аспектах TDL. GF без микробов, M8 GF мышей, моноинокулированных штаммом M8 E. coli , GEM метаболические модели в масштабе генома

Эти данные демонстрируют, что колонизация M8 мышей нацелена на пути, которые, как известно, регулируют метаболизм липидов.Затем мы попытались определить, как эти изменения в мРНК отражают новое состояние липидного метаболизма у мышей M8.

TDL – транскриптомика и LIPID MAPS

В TDL мы сначала картировали дифференциально экспрессируемые гены в базе данных протеомов LIPID MAPS (LMPD) 13 (материалы и методы). LMPD с его исчерпывающей таблицей основных видов липидов, регуляторных генов и картирования биохимических путей позволили идентифицировать потенциальное влияние дифференциально экспрессируемых компонентов, специфичных для метаболизма липидов.Для Mus musculus , из 1082 уникальных генов, участвующих в изменении липидного метаболизма в LMPD, перекрывающих дифференциально экспрессируемые гены (696 генов, идентифицированных выше), мы идентифицировали 51 уникальный ген, потенциально влияющий на метаболизм липидов (рис. 3c и дополнительный S5Data.xlsx). Пространство потенциального действия этих 51 связанного с липидами гена было проанализировано с использованием KEGG 33,34 и Reactome. 15,16 В целом было предсказано, что эти гены будут влиять на ремоделирование ацильной цепи, а также на биосинтез глицерофосфолипидов, включая PE, PI, PS, PG, PC (сокращения в таблице 2), метаболизм арахидоновой кислоты и альфа-линоленовой кислоты, переваривание пищевые липиды, метаболизм гликосфинголипидов, метаболизм липопротеинов, биосинтез очень длинноцепочечных жирных ацил-КоА, биосинтез холестерина и метаболизм сфинголипидов.

Таблица 2 Используемая номенклатура липидов

TDL – транскриптомика и реактом

Впоследствии, вместо того, чтобы ограничивать себя только предварительно заданными генами, связанными с метаболизмом липидов (как обсуждалось выше), мы исследовали потенциальный эффект всех 696 дифференциально наблюдаемых генов с помощью Reactome. 15,16 В частности, для Mus musculus эти 696 генов потенциально влияли на 789 прогнозируемых классов / групп (дополнительный S6Data.xlsx). Далее мы включили в короткий список предсказанный список те, которые влияют на метаболизм липидов, таким образом оставив 58 уникальных дифференциально экспрессируемых генов (рис. 3c), влияющих на метаболизм липидов в 43 различных классах / группах. В целом, ремоделирование ацильной цепи, а также биосинтез глицерофосфолипидов (PE, PI, PS, PG, PC), биосинтез de novo фосфолипидов, гликосфинголипидов и сфинголипидов, метаболизм арахидоновой кислоты и альфа-линоленовой кислоты, биосинтез холестерина и триглицерид метаболизма были прогнозируется воздействие.

Несмотря на то, что LMPD и Reactome частично совпадают с точки зрения прогнозируемых изменений липидов, точная тканевая / клеточная информация о том, что может быть затронуто, и какие именно виды липидов все еще отсутствуют. Чтобы решить эту проблему, мы затем использовали GEM подвздошной кишки.

TDL-транскриптомика и GEM

Мы использовали реконструированный GEM для метаболизма подвздошной кишки мыши 23 для нашего текущего исследования. Ileum GEM охватывает около 1353 генов и 4525 реакций с участием 3874 метаболитов.По сути, это захватывает подмножество метаболических ферментов на тканевом уровне, обеспечивая более высокое разрешение и тканевую информацию о том, какие подмножества метаболических ферментов и путей имеют отношение к изменению липидов. Ключевым моментом, который следует отметить, является то, что используемый GEM имеет ограничения с точки зрения глубины гранулярности для различных липидов. Из 696 дифференциально регулируемых транскриптов 54 были релевантными / вовлеченными в GEM подвздошной кишки (дополнительный S7Data.xlsx) (Fig. 3d). Эти гены могут влиять на реакции в разных формах.На некоторые реакции может напрямую влиять дифференциальная экспрессия одного гена / реакции (разные реакции, разные гены, один ген на реакцию), а на другие — комбинации двух или более генов. Например, в случае реакции H + [c] + NADPH [c] + O 2 [c] + ретиноат [c] => 18-гидрокси-все-транс-ретиноат [c] + H 2 O [c] + NADP + [c] , есть два гена, которые могут повлиять на него ( CYP2C55 и CYP4B1 , оба экспрессируются по-разному).Таким образом, переводя статистически разные и метаболически релевантные гены в реакции, мы предсказали, что 54 гена могут повлиять на 400 метаболических реакций (дополнительный S7Data.xlsx). Из этих реакций на 330 в первую очередь повлияла дифференциальная экспрессия одного гена. Например, было предсказано, что ген ACSL6 будет воздействовать на 114 реакций по отдельности. Для других реакций (70) было задействовано два или более гена. Эти 400 реакций могут, соответственно, напрямую влиять на уровни 743 метаболитов.Эти метаболиты были распределены по нескольким компартментам (например, цитозоль, митохондрии) и варьировались от H + до сложных липидов. Мы отфильтровали этот список метаболитов, используя фильтр состава C 4 H 8 O 2 (за исключением CHO, как пороговое значение для липидов и связанных с липидами видов), чтобы еще больше сузить прогнозируемое пространство метаболитов.

TDL-формулировка консенсусного предсказанного липидома

Унаследованные знания и наши доклинические результаты, представленные выше, позволяют предположить, что E.coli может изменить биодоступность и переваривание пищевых липидов, вызвать воспалительный и иммунный ответ и непосредственно способствовать измерению липидов и статуса липидного метаболизма в подвздошной кишке. Используя разные ветви TDL, мы спрогнозировали влияние на уровень как видов, так и классов липидов. Из-за внутренних различий в базах данных информация содержала глубину и объем курации, разные наборы генов давали разные прогнозы. Например, 32/58 гена, задействованных Reactome в влиянии на метаболизм липидов, были общими для базы данных LMPD (рис.3д), из которых 15 были общими для GEM. Сходным образом 21 ген обычно вовлечен между GEM и ветвями LMPD и 22 гена между GEM и ответвлениями Reactome. Интересно, что 26 генов могут однозначно влиять на липидный метаболизм посредством GEM, 13 — только для LMPD и 19 — только для Reactome. Сложные изменения всех генов (влияющие на липидный обмен через Reactome, LMPD и GEM, всего 103 гена) показаны на рис. 4а. Гены сортируются на основе того, какая ветвь и сколько ветвей TDL учитываются, чтобы предсказать изменения в метаболизме липидов.15 лучших генов (то есть от ACAA1A до PRKCE ) обычно учитываются всеми ветвями TDL и позволяют прогнозировать влияние на метаболизм липидов. Следующие 30 генов (то есть с AKR1A1 до VAPB ) учитываются только двумя ветвями TDL (то есть либо Reactome и LMPD, либо LMPD и GEM, либо Reactome и GEM). Следующие 58 генов (то есть от ADSL к AKR1B10) учитываются только одной ветвью TDL при прогнозировании изменений липидного обмена. Таким образом, каждая из ветвей имеет уникальные данные, которые можно добавить к совокупному предсказанному измененному липидому.Впоследствии мы сформулировали консенсус предсказанный липидом как непредвзятую компиляцию предсказаний (рис. 3b-d) из всех ветвей TDL. Этот прогнозируемый измененный список состоит из точных видов липидов, например, LTB4, 1-HETE и классов липидов (например, PI, пулы PC). Кроме того, мы также включили несколько классов липидов (которые, по прогнозам, не будут затронуты) для измерения, чтобы использовать их в качестве отрицательного контроля. Взаимосвязь между отдельными генами и липидами или липидными путями для каждой из ветвей TDL представлена ​​в дополнительных S12Data.xlsx.

Рис. 4

Прогнозы TDL и липидомические измерения. a Кратковременные изменения статистически различных генов подвздошной кишки мышей GF и M8, которые влияют на метаболизм липидов в подвздошной кишке. Гены сортируются на основе их значения в различных аспектах TDL. Первый столбец указывает, участвует ли соответствующий ген во влиянии на метаболизм липидов через GEM (G — если да, иначе -), через LMPD (L — если да, иначе -) и через Reactome (R — если да, иначе -).Во втором столбце указаны скорректированные значения p после коррекции FDR. В третьем столбце указано название гена. Зеленые заполненные столбцы указывают на более высокую экспрессию GF, в то время как красные заполненные столбцы указывают на более высокие уровни экспрессии в подвздошной кишке мышей M8. b Показан логарифм соотношений средних уровней статистически различных липидов между подвздошной кишкой мышей GF и M8. Зеленые заполненные столбцы указывают на более высокие уровни липидов в GF, в то время как красные заполненные столбцы указывают на более высокие уровни в подвздошной кишке мышей M8. Полосы с синей заливкой указывают на липиды, наблюдаемые только в образцах GF, а полоски с желтой заливкой указывают на липиды, наблюдаемые только в образцах мышей M8.Липиды сортируются по типу. Серые кружки с числами на панели a и панели b показывают, какой ген, приведенный в таблице на панели a , является предиктором того, какие виды липидов или классы липидов показаны на панели b . Например, ген ACAA1 , отмеченный серым кружком с номером 1, предсказывает изменения уровней липида LTB4. GEM метаболических моделей в масштабе генома, LMPD LIPID MAPS, оставшиеся липиды приведены в таблице 2

Липидомия подвздошной кишки

Затем мы оценили полезность стратегии TDL, чтобы помочь направить наше исследование воздействия E.coli на липидный обмен на основе гипотез. Всего мы измерили и аннотировали 383 вида липидов (материалы и методы). Отбор аннотированных видов был основан на кумулятивном прогнозе измененных липидных видов с помощью стратегии TDL (описанной выше). Из 383 аннотированных видов 55 липидов значительно различались между образцами подвздошной кишки мышей GF и M8 (рис. 4b, дополнительный S8Data.xlsx).

прогнозов TDL, состоящих из ~ 700 компонентов, включая 462 уникальных вида (удаление повторяющихся видов в разных клеточных компартментах), 138 CoA (которые мы не измеряли из-за тканевых ограничений), 13 пулов (1-ацилглицерин-3P-LD-TG1 бассейн, пул 1-ацил-PE, пул 2-лизолецитина, пул церамидов, пул жирных кислот-LD-PC, пул жирных кислот-LD-PE, пул жирных кислот-LD-TG2, пул жирных кислот-ретинола, пул глюкозилцерамидов, Пул LacCer, пул PC-LD, пул PE-LD, пул PI), 23 вида, которые включали кофакторы и молекулы, не связанные с липидами, такие как АТФ, АДФ и НАДФ среди других.Из 288 оставшихся уникальных видов липидов 30 принадлежали к метаболизму арахидоновой кислоты (AAM), специфически идентифицированному с использованием GEM-ветви TDL (дополнительный S9Data.xlsx). Другие ветви TDL также предсказывали изменения на уровне пути AAM. Это демонстрирует одно ключевое преимущество использования TDL, при котором мы получаем точное название липидов для измерения на основе профилей транскриптомики, специфичных для исследования. Гены, влияющие на этот прогноз, включали ACSL6 , CYP2C55 , GPX1 , ACAA1A и HPGD (связи между генами на рис.4a и предсказанные липиды на фиг. 4b, показанные серыми кружками с цифрами). Например, изменения уровней мРНК GPX1 у мышей M8 транслируются в предсказанные изменения липидов 15-HETE и 5-HETE. Соответственно, мы измерили более 100 видов биоактивных липидов в арахидоновом каскаде 11,35 , из которых десять липидов статистически различались у мышей GF и M8. Все десять липидов (11-HETE, 13-HDoHE, 13-oxoOD, 14-HDoHE, 15-HEPE, 15-HETE, 17-HDoHE, 5-HETE, LTB4 и PGJ2) имели более высокие уровни у мышей M8 (рис. .4б, сокращения в таблице 2). ACSL6 , GPX1 , ACAA1A и HPGD обычно учитывались всеми ветвями TDL для воздействия на AAM. Однако ген CYP2C55 был однозначно учтен GEM-ветвью TDL как влияющий на уровни LTB4 и 11-HETE, участвующие в AAM. Это демонстрирует полезность использования комбинации нескольких ветвей для достижения исчерпывающего предсказанного липидома для измерения и анализа. E. coli в более ранних исследованиях участвовал в изменении уровней компонентов AAM, 36 , который, как сообщалось, также опосредовал воспалительный статус у хозяина. 37

Из TDL мы также получаем информацию о классах (или пулах) липидов для измерения. Это связано с отсутствием подробных механистических знаний, доступных или собранных в GEM. Мы измерили и проанализировали липиды в различных классах: (а) классы, предсказанные по всем ветвям TDL, (b) предсказанные только по одной ветви TDL, и (c) предсказанные ни по одной из ветвей TDL.

Все ветви TDL предсказали воздействия на пулы PI, PC, церамидов, глюкозилцерамидов, DAG, TAG и PE.Было предсказано, что на ИП воздействуют обе ветви базы данных TDL (через ремоделирование ацильной цепи генами PLA2G2F, PLA2G16, PLA2G12A, PLA2G2D, MBOAT7, PLA2G2A, PLA2G4A , синтез генами CDIPT , метаболизм PI INPP5K, PIP5K1B, PIK3CG и MTMR7 ) и ветвью GEM TDL (через ген MTMR7 , кодирующий миотубулярный белок 7) (рис. 4b). Из 18 измеренных видов ИП 5 (ИП 34: 2, 36: 2, 36: 3, 36: 4 и 38: 4 (все уменьшено у мышей M8)) значительно различались (рис.4б). Точно так же влияние на ПК предсказывалось всеми ветвями TDL (через ремоделирование ацильной цепи генами PLA2G2F, PLA2G16, PLA2G12A, PLA2G2D, PLA2G2A, PLA2G4A и синтез геном CHKB ) и посредством генной ветви GEM TDL PLA2G4A (выше у мышей M8)) (рис. 4b). 2/17 видов PC (PC 35: 2 и 37: 2 (оба уменьшены у мышей M8)) значительно различались (рис. 4b). Изменения метаболизма сфинголипидов предсказывались всеми ветвями TDL. В частности, ветвь TDL GEM предсказала изменения в пулах церамидов и глюкозилцерамидов.3/6 видов церамидов (Cer 40: 1, 42: 1 и 42: 2, все уменьшено у мышей M8) значительно различались (рис. 4b). Ключевыми генами, опосредующими это предсказание, были GBA (кратное изменение 1,26, выше в GF), VAPB (кратное изменение 1,20, выше в GF) и OGT (кратное изменение 1,52, выше в GF). 2/45 DAG (DAG 35: 0 (увеличенный у мышей M8) и DAG 40: 4 (уменьшенный у M8 мышей)) значительно различались (фиг. 4b). 18/94 ТЕГОВ (ТЕГ 50: 2, 51: 3, 52: 2, 52: 3, 52: 4, 53: 0, 53: 2, 53: 3, 53: 4, 53: 5, 54: 3, 54: 4, 54: 5, 54: 6, 58: 3, 58: 4, 58: 5 и 60: 4 (все, кроме TAG 53: 0 были ниже у мышей M8)) значительно различались.Мы наблюдали, что 0/23 видов PEO, 5/9 видов LPE-O (LPE-O 16: 1, 18: 0, 18: 1, 20: 0, 20: 1 (все увеличено у мышей M8)) и 0 / 12 видов LPE существенно различались. Подобно пулу ПК, гены PLA2G2F, PLA2G16, PLA2G12A, PLA2G2D, PLA2G2A, PLA2G4A и CHKB были ключевыми генами, предсказывающими изменения для PE. Для PE прогноз был на более высоком уровне и не имел более глубокого разделения на конкретные подгруппы.

Воздействие на определенные классы липидов было предсказано только выборочными ветвями TDL, например.g., PS и PG бассейны. Прогнозировалось, что на пулы PS и PG будут влиять ветви базы данных, а не ветвь GEM TDL. 8/23 видов PS (PS 36: 1, 36: 2, 38: 3, 38: 4, 40: 1, 40: 2, 40: 3 и 40: 4 (все уменьшены у мышей M8)) значительно различались ( Рис. 4б). 1/12 видов PG (PG 18: 1/16: 0 (снижено у мышей M8)) значительно различались. Это иллюстрирует различия в возможностях прогнозирования и объеме различных ветвей TDL.

Лизофосфатидилинозитол (LPI), лизофосфатидилхолин (LPC), лизофасфатидилглицерин (LPG), сфингомиелин (SM), лизофосфатические соединения (LPA) не подвержены влиянию TDL.В качестве отрицательного контроля мы проанализировали эти виды. В соответствии с прогнозами, уровни 6/6 LPI, 4/4 LPC, 17/17 LPG, 4/4 SM, 15/15 LPA статистически не различались.

Были также измерены несколько лизофосфолипидов, включая; LPI (0/6 статистически различаются между GF и M8), LPC (0/4 статистически различаются), LPE (0/12 статистически различаются), LPS (1/17 статистически различаются), LPA (0/15 статистически различаются), LPCO (0/4 статистически различаются), LPG (0/17 статистически различаются).

В некоторых случаях предсказания TDL были неверными. Например, предсказывалось, что на PA будут влиять ветви базы данных TDL, но не ветвь GEM. Однако измеренные значения PA 12/12 не показали значительных различий. Согласно прогнозам, лизофосфатидилсерины (ЛПС) не изменятся ни в одной из ветвей. Однако из 17 измеренных видов LPS LPS 22: 6 присутствовал только у мышей M8 (рис. 4b). Кроме того, несколько липидов, включая DAG 40: 4, PC 37: 2, TAG 51: 3, 53: 2, 53: 3, 53: 4, 53: 5, 58: 3, 58: 4, 58: 5 и 60: 4 наблюдались только в GF.Эти молекулы могут быть уменьшены прямо или косвенно за счет присутствия M8 ниже пределов обнаружения (синие столбцы на рис. 4b).

В целом, изменения липидного метаболизма у мышей GF и M8 были сосредоточены вокруг снижения глицерофосфолипидов и увеличения AAM (рис. 5). За исключением ошибочных прогнозов в случае PA, наличия LPS 22: 6 и недостаточного разрешения в случае PE, прогнозы TDL были благоприятно повторены в измеренных липидах (рис. 6a, дополнительное примечание).Составив прогнозы измерений TDL и липидов, мы можем разделить различные классы липидов на разные категории; (a) Категория 1: все ветви TDL предсказали изменение правильно (например, PI, PC, пулы церамидов), (b) Категория 2: только одна ветвь TDL предсказала изменение, и оно было правильным (например, фосфатидилсерин (PS), фосфатидилглицерин (PG ) пулы), (c) Категория 3: все ветви TDL не предсказали никаких изменений, и это было правильно (например, LPI, пулы LPC), (d) Категория 4: только одна ветвь TDL предсказала изменение, и это было неверно (e.g., пулы PA), (e) Категория 5: все ветви TDL не предсказали никаких изменений, и это было неверно (например, пул PE), и (f) где ни одна из ветвей TDL не предсказала изменение, и это было неверно (например, LPS бассейн). В целом методология TDL несовершенна и не дает 100-процентного верного прогноза. Тем не менее, по сравнению с использованием одной ветви (то есть либо унаследованных знаний, баз данных или одних только GEM), всеобъемлющая и интегрированная стратегия, представленная в TDL, делает его более готовым для надежного прогнозирования измененного липидного пространства для измерения и анализа.Некоторые из текущих ограничений и улучшенной точности могут и в конечном итоге будут устранены по мере того, как аннотации и компиляции в базах данных и GEM станут более всеобъемлющими.

Рис. 5

Измененный липидный метаболизм подвздошной кишки после колонизации E. coli (штамм M8). Гены, указанные красным или зеленым текстом, указывают на статистически разные кратные изменения с соответственно более высокими или более низкими количествами у мышей M8 по сравнению с подвздошной кишкой мышей GF. Красные или зеленые закрашенные кружки указывают на статистически большее или меньшее количество липидов у мышей M8 по сравнению с подвздошной кишкой GF, как показано в легенде (а).Стрелки сплошной линией указывают на прямую связь между двумя видами, пунктирная линия со стрелкой между двумя видами указывает на многоступенчатое соединение, а пунктирная линия без вида на одном конце указывает на соединения, не показанные, как обозначено в части легенды (b)

Рис. 6

Показатели TDL и многофакторное влияние на метаболизм липидов. a TDL для прогнозирования изменений в различных классах липидов. b Эксперименты in vitro по выявлению потенциального вклада бактерий в производство статистически различных липидов, наблюдаемых в образцах подвздошной кишки мышей GF и M8. c Гипотетические пути воздействия E. coli на метаболизм липидов подвздошной кишки. Сокращения: аббревиатуры липидов, приведенные в таблице 2, GEM метаболическая модель в масштабе генома, Ctrl контроль, TCA таурохолевая кислота, HG с высоким содержанием глюкозы, LG с низким содержанием глюкозы

Помимо подвздошной кишки, 127 липидов были измерены / аннотированы / проанализированы в двенадцатиперстной кишке, 179 — в тощей кишке и 164 — в толстой кишке. Данные представлены в дополнительных данных S11Data.xlsx. Статистических различий в липидах мышей GF и M8 в тощей кишке и толстой кишке не было. Однако липиды 3/127, включая PGF2a, PG 20: 4/18: 2 и PI 39: 4 (пониженные уровни у мышей M8), статистически различались у мышей GF и M8 в двенадцатиперстной кишке. Мы обнаружили большую вариабельность уровней липидов в двенадцатиперстной кишке, тощей кишке и толстой кишке по сравнению с отчетливым измененным ответом в подвздошной кишке, что подчеркивает наш выбор сосредоточиться на подвздошной кишке.

Оценка бактериальных липидов in vitro

Одним из ограничений используемых метаболических моделей и баз данных является то, что они могут учитывать только изменения липидного метаболизма, зависящие от состояния организма-хозяина.Интересно, что TAG 53: 0, DAG 35: 0, LPE-O 20: 1 и LPS 22: 6 были обнаружены только в образцах M8 (желтые полоски на фиг. 4b). Одним из объяснений уникального присутствия этих молекул у мышей M8 может быть то, что они потенциально имеют происхождение E. coli . Липиды с жирными кислотами с нечетной цепью, такие как M8-специфические липиды TAG 53: 0 и DAG 35: 0, не происходят от млекопитающих. Чтобы изучить метаболическую гибкость и потенциальный прямой вклад липидов, полученных из M8, в профили мышей GF и M8, мы провели исследования in vitro с изолятом M8 в различных условиях роста (низкий / высокий уровень глюкозы, ± пальмитиновая кислота, ± пальмовое масло, ± ТСА: материалы и методы) (рис.6б). Всего было измерено, аннотировано и проанализировано 235 видов липидов (дополнительный S10Data.xlsx). Девяносто семь липидов обычно наблюдались в образцах in vitro и in vivo. Максимальное разнообразие липидов наблюдалось в контроле и в условиях роста TCA + пальмовое масло. 16/97 общих липидов наблюдались на статистически разных уровнях между GF и M8 подвздошной кишки. LPE-O 16: 1 и LPE-O 18: 1 (оба с более высоким содержанием M8) могут селективно продуцироваться M8 in vitro (высокое содержание глюкозы + TCA). PG 18: 1/16: 0 (ниже в M8) продуцировался M8 независимо от условий выращивания in vitro.Несколько ТАГ были обнаружены в определенных условиях роста in vitro (фиг. 6b). Это включало TAG 53: 0, который ранее был обнаружен только в подвздошной кишке мышей M8.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *